第二军医大学学报
第二軍醫大學學報
제이군의대학학보
ACADEMIC JOURNAL OF SECOND MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2002年
11期
1201-1203
,共3页
张莉%郭葆玉%苗红%邱磊%张冉%道书艳%卞广兴
張莉%郭葆玉%苗紅%邱磊%張冉%道書豔%卞廣興
장리%곽보옥%묘홍%구뢰%장염%도서염%변엄흥
人趋化因子受体5%基因克隆%融合表达%抗体
人趨化因子受體5%基因剋隆%融閤錶達%抗體
인추화인자수체5%기인극륭%융합표체%항체
目的:获得人β趋化因子受体5(huCCR5)N端膜外第一襻基因片段的序列,并构建表达huCCR5 N 端膜外第一襻的重组体,实现其有效表达及其特异抗体的鉴定.方法:计算机分析比较趋化因子超家族部分成员,定位超家族中同源性最低的N端膜外第一襻结构域.PCR扩增出该结构域114个核苷酸序列基因片段,构建融合表达载体pGEX-IN/NR5 ,经测序确定基因片段正确后,在大肠杆菌中表达.表达产物经纯化后免疫新西兰兔.ELISA鉴定CCR5 N端肽段特异性抗体.结果:序列测定结果与文献报道一致,经计算机作图分析ELISA实验数据证明得到抗huCCR5 N端肽段的特异性抗体.结论:本方法采用pGEX-IN在大肠杆菌DE3中有效表达CCR5 N 端膜外第一襻基因片段,并实现了对其特异性抗体的鉴定,为进一步的研究奠定基础.
目的:穫得人β趨化因子受體5(huCCR5)N耑膜外第一襻基因片段的序列,併構建錶達huCCR5 N 耑膜外第一襻的重組體,實現其有效錶達及其特異抗體的鑒定.方法:計算機分析比較趨化因子超傢族部分成員,定位超傢族中同源性最低的N耑膜外第一襻結構域.PCR擴增齣該結構域114箇覈苷痠序列基因片段,構建融閤錶達載體pGEX-IN/NR5 ,經測序確定基因片段正確後,在大腸桿菌中錶達.錶達產物經純化後免疫新西蘭兔.ELISA鑒定CCR5 N耑肽段特異性抗體.結果:序列測定結果與文獻報道一緻,經計算機作圖分析ELISA實驗數據證明得到抗huCCR5 N耑肽段的特異性抗體.結論:本方法採用pGEX-IN在大腸桿菌DE3中有效錶達CCR5 N 耑膜外第一襻基因片段,併實現瞭對其特異性抗體的鑒定,為進一步的研究奠定基礎.
목적:획득인β추화인자수체5(huCCR5)N단막외제일반기인편단적서렬,병구건표체huCCR5 N 단막외제일반적중조체,실현기유효표체급기특이항체적감정.방법:계산궤분석비교추화인자초가족부분성원,정위초가족중동원성최저적N단막외제일반결구역.PCR확증출해결구역114개핵감산서렬기인편단,구건융합표체재체pGEX-IN/NR5 ,경측서학정기인편단정학후,재대장간균중표체.표체산물경순화후면역신서란토.ELISA감정CCR5 N단태단특이성항체.결과:서렬측정결과여문헌보도일치,경계산궤작도분석ELISA실험수거증명득도항huCCR5 N단태단적특이성항체.결론:본방법채용pGEX-IN재대장간균DE3중유효표체CCR5 N 단막외제일반기인편단,병실현료대기특이성항체적감정,위진일보적연구전정기출.
