科学通报
科學通報
과학통보
CHINESE SCIENCE BULLETIN
2002年
5期
374-377
,共4页
李满玉%范衡宇%佟超%陈大元%夏国良%孙青原
李滿玉%範衡宇%佟超%陳大元%夏國良%孫青原
리만옥%범형우%동초%진대원%하국량%손청원
猪%卵母细胞%MAPK%体外成熟%体外受精
豬%卵母細胞%MAPK%體外成熟%體外受精
저%란모세포%MAPK%체외성숙%체외수정
从猪卵巢中获取卵母细胞, 在体外成熟、体外受精和电激活后的不同时间采集样品, 经裂解变性后利用蛋白电泳和蛋白免疫印迹技术, 检测其中MAPK磷酸化的变化, 并且用免疫荧光化学法观察ERK2的迁移. 结果显示, 猪卵母细胞中MAPK的量基本不变. 体外培养前GV期猪卵内MAPK无磷酸化, 培养20 h后MAPK开始发生磷酸化, 30 h时进一步增加, 36 h时有所下降, 40 h时达到最高, 一直到60 h仍未降低. 在卵母细胞成熟过程中, ERK2由胞外向胞内迁移, 并分布于核区. 猪卵母细胞电激活后18, 20 h MAPK磷酸化降低, 几乎被灭活, 但22 h时开始上升. 体外受精12 h后MAPK完全去磷酸化, 16 h时重新磷酸化. 以上结果表明, MAPK磷酸化/去磷酸化在猪卵母细胞MⅠ向MⅡ转化、受精后原核的形成及第一次有丝分裂的启动等方面可能发挥重要的调节作用.
從豬卵巢中穫取卵母細胞, 在體外成熟、體外受精和電激活後的不同時間採集樣品, 經裂解變性後利用蛋白電泳和蛋白免疫印跡技術, 檢測其中MAPK燐痠化的變化, 併且用免疫熒光化學法觀察ERK2的遷移. 結果顯示, 豬卵母細胞中MAPK的量基本不變. 體外培養前GV期豬卵內MAPK無燐痠化, 培養20 h後MAPK開始髮生燐痠化, 30 h時進一步增加, 36 h時有所下降, 40 h時達到最高, 一直到60 h仍未降低. 在卵母細胞成熟過程中, ERK2由胞外嚮胞內遷移, 併分佈于覈區. 豬卵母細胞電激活後18, 20 h MAPK燐痠化降低, 幾乎被滅活, 但22 h時開始上升. 體外受精12 h後MAPK完全去燐痠化, 16 h時重新燐痠化. 以上結果錶明, MAPK燐痠化/去燐痠化在豬卵母細胞MⅠ嚮MⅡ轉化、受精後原覈的形成及第一次有絲分裂的啟動等方麵可能髮揮重要的調節作用.
종저란소중획취란모세포, 재체외성숙、체외수정화전격활후적불동시간채집양품, 경렬해변성후이용단백전영화단백면역인적기술, 검측기중MAPK린산화적변화, 병차용면역형광화학법관찰ERK2적천이. 결과현시, 저란모세포중MAPK적량기본불변. 체외배양전GV기저란내MAPK무린산화, 배양20 h후MAPK개시발생린산화, 30 h시진일보증가, 36 h시유소하강, 40 h시체도최고, 일직도60 h잉미강저. 재란모세포성숙과정중, ERK2유포외향포내천이, 병분포우핵구. 저란모세포전격활후18, 20 h MAPK린산화강저, 궤호피멸활, 단22 h시개시상승. 체외수정12 h후MAPK완전거린산화, 16 h시중신린산화. 이상결과표명, MAPK린산화/거린산화재저란모세포MⅠ향MⅡ전화、수정후원핵적형성급제일차유사분렬적계동등방면가능발휘중요적조절작용.
