肿瘤
腫瘤
종류
TUMOR
2002年
3期
191-193
,共3页
王俊茹%覃文新%舒惠群%潘勇%张玉燕%万大方
王俊茹%覃文新%舒惠群%潘勇%張玉燕%萬大方
왕준여%담문신%서혜군%반용%장옥연%만대방
转染%诱导表达%四环素调控
轉染%誘導錶達%四環素調控
전염%유도표체%사배소조공
目的建立可受四环素诱导调控的高表达外源基因的真核表达体系Hep3BTet-On细胞株,用于基因功能的研究.方法 将pTet-On质粒用脂质体介导法转染Hep3B细胞,经G418筛选后的克隆用有限稀释法进行单克隆化.单克隆分别扩增后,瞬时转染pTRE-luc(编码荧光素酶蛋白)质粒,Dox诱导表达后,检测荧光素酶活性,逐一筛选四环素调控高表达外源基因的Hep3B Tet-On细胞株.结果成功构建了一株受Dox调控的高表达低背景的Hep3B Tet-On细胞株.结论 Hep3B Tet On细胞株可用于外源基因的真核调控高表达,为研究真核基因功能提供了一种有力的实验手段.
目的建立可受四環素誘導調控的高錶達外源基因的真覈錶達體繫Hep3BTet-On細胞株,用于基因功能的研究.方法 將pTet-On質粒用脂質體介導法轉染Hep3B細胞,經G418篩選後的剋隆用有限稀釋法進行單剋隆化.單剋隆分彆擴增後,瞬時轉染pTRE-luc(編碼熒光素酶蛋白)質粒,Dox誘導錶達後,檢測熒光素酶活性,逐一篩選四環素調控高錶達外源基因的Hep3B Tet-On細胞株.結果成功構建瞭一株受Dox調控的高錶達低揹景的Hep3B Tet-On細胞株.結論 Hep3B Tet On細胞株可用于外源基因的真覈調控高錶達,為研究真覈基因功能提供瞭一種有力的實驗手段.
목적건립가수사배소유도조공적고표체외원기인적진핵표체체계Hep3BTet-On세포주,용우기인공능적연구.방법 장pTet-On질립용지질체개도법전염Hep3B세포,경G418사선후적극륭용유한희석법진행단극륭화.단극륭분별확증후,순시전염pTRE-luc(편마형광소매단백)질립,Dox유도표체후,검측형광소매활성,축일사선사배소조공고표체외원기인적Hep3B Tet-On세포주.결과성공구건료일주수Dox조공적고표체저배경적Hep3B Tet-On세포주.결론 Hep3B Tet On세포주가용우외원기인적진핵조공고표체,위연구진핵기인공능제공료일충유력적실험수단.
