药物生物技术
藥物生物技術
약물생물기술
PHARMACEUTICAL BIOTECHNOLOGY
2002年
3期
128-132
,共5页
于敏%王羽雄%顾银良%宋后燕
于敏%王羽雄%顧銀良%宋後燕
우민%왕우웅%고은량%송후연
组织因子%包涵体%外源性凝血
組織因子%包涵體%外源性凝血
조직인자%포함체%외원성응혈
组织因子是外源性凝血途径的启动因子,为膜受体蛋白,胞外区的促凝血功能几乎与完整分子相同,因此采用重组DNA技术制备组织因子的胞外区分子,并对其活性进行研究,以便替代兔脑粉用于PT检测.以人胎盘总RNA为模板,用RT-PCR扩增组织因子胞外区cDNA基因,经序列分析证实后在大肠杆菌中表达,产物形成包涵体.表达产物经复性、离子交换和凝胶过滤色谱纯化后与磷脂结合,进行促凝血试验.结果表明在磷脂存在下,可溶性TF有明显的促凝血活性,可以取代兔脑粉用于PT检测.
組織因子是外源性凝血途徑的啟動因子,為膜受體蛋白,胞外區的促凝血功能幾乎與完整分子相同,因此採用重組DNA技術製備組織因子的胞外區分子,併對其活性進行研究,以便替代兔腦粉用于PT檢測.以人胎盤總RNA為模闆,用RT-PCR擴增組織因子胞外區cDNA基因,經序列分析證實後在大腸桿菌中錶達,產物形成包涵體.錶達產物經複性、離子交換和凝膠過濾色譜純化後與燐脂結閤,進行促凝血試驗.結果錶明在燐脂存在下,可溶性TF有明顯的促凝血活性,可以取代兔腦粉用于PT檢測.
조직인자시외원성응혈도경적계동인자,위막수체단백,포외구적촉응혈공능궤호여완정분자상동,인차채용중조DNA기술제비조직인자적포외구분자,병대기활성진행연구,이편체대토뇌분용우PT검측.이인태반총RNA위모판,용RT-PCR확증조직인자포외구cDNA기인,경서렬분석증실후재대장간균중표체,산물형성포함체.표체산물경복성、리자교환화응효과려색보순화후여린지결합,진행촉응혈시험.결과표명재린지존재하,가용성TF유명현적촉응혈활성,가이취대토뇌분용우PT검측.
