华西口腔医学杂志
華西口腔醫學雜誌
화서구강의학잡지
WEST CHINA JOURNAL OF STOMATOLOGY
2002年
1期
62-65
,共4页
庞若愚%张蓉%章锦才%张蕴惠%俞少杰
龐若愚%張蓉%章錦纔%張蘊惠%俞少傑
방약우%장용%장금재%장온혜%유소걸
口腔链球菌%丙酮酸氧化酶%同源重组%过氧化氢%变异
口腔鏈毬菌%丙酮痠氧化酶%同源重組%過氧化氫%變異
구강련구균%병동산양화매%동원중조%과양화경%변이
目的:利用口腔链球菌丙酮酸氧化酶基因(sopox)的克隆序列,重组构建新的不能产生H2O2的口腔链球菌变异株.方法:口腔链球菌株ATCC10557经培养后用酚-氯仿法抽提细菌染色体基因组DNA,经PCR扩增sopox基因,用BamHI进行限制酶切;参照Chris方法进行电转化,挑选阳性菌落测定其上清液中H2O2的含量;将细菌传3～4代后再次重复上述检测.结果:转化子经筛选后得到1株阳性菌落,测定上清液中H2O2含量,第1次检测表明变异株产生H2O2的量仅有所下降(介于阳性对照ATCC 10557和阴性对照大肠杆菌JM109之间),经3～4次传代后变异株中上清液H2O2量已经明显低于阴性对照.结论:成功构建了口腔链球菌丙酮酸氧化酶基因缺陷型变异株.
目的:利用口腔鏈毬菌丙酮痠氧化酶基因(sopox)的剋隆序列,重組構建新的不能產生H2O2的口腔鏈毬菌變異株.方法:口腔鏈毬菌株ATCC10557經培養後用酚-氯倣法抽提細菌染色體基因組DNA,經PCR擴增sopox基因,用BamHI進行限製酶切;參照Chris方法進行電轉化,挑選暘性菌落測定其上清液中H2O2的含量;將細菌傳3～4代後再次重複上述檢測.結果:轉化子經篩選後得到1株暘性菌落,測定上清液中H2O2含量,第1次檢測錶明變異株產生H2O2的量僅有所下降(介于暘性對照ATCC 10557和陰性對照大腸桿菌JM109之間),經3～4次傳代後變異株中上清液H2O2量已經明顯低于陰性對照.結論:成功構建瞭口腔鏈毬菌丙酮痠氧化酶基因缺陷型變異株.
목적:이용구강련구균병동산양화매기인(sopox)적극륭서렬,중조구건신적불능산생H2O2적구강련구균변이주.방법:구강련구균주ATCC10557경배양후용분-록방법추제세균염색체기인조DNA,경PCR확증sopox기인,용BamHI진행한제매절;삼조Chris방법진행전전화,도선양성균락측정기상청액중H2O2적함량;장세균전3～4대후재차중복상술검측.결과:전화자경사선후득도1주양성균락,측정상청액중H2O2함량,제1차검측표명변이주산생H2O2적량부유소하강(개우양성대조ATCC 10557화음성대조대장간균JM109지간),경3～4차전대후변이주중상청액H2O2량이경명현저우음성대조.결론:성공구건료구강련구균병동산양화매기인결함형변이주.
