中国生化药物杂志
中國生化藥物雜誌
중국생화약물잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMICAL PHARMACEUTICS
2001年
6期
271-274
,共4页
范俊虎%李汉卿%张丽增%袁静明
範俊虎%李漢卿%張麗增%袁靜明
범준호%리한경%장려증%원정명
人尿%胰蛋白酶抑制剂%亲和层析
人尿%胰蛋白酶抑製劑%親和層析
인뇨%이단백매억제제%친화층석
目的以人尿浓缩物为原料,对人尿胰蛋白酶抑制剂的分离纯化技术进行研究.方法利用纯胰蛋白酶作为配体偶联于CNBr-Sepharose-4B为亲和载体,在不同条件下洗脱亲和蛋白,可从粗品溶液中快速分离纯化具有胰蛋白酶抑制活性的两种纯产物.结果层析图谱与SDS-PAGE分析表明,根据洗脱条件,可将有抑制活性的20 kD和40 kD蛋白质分离为两个单独组份或混合物.其中20 kD组份的抑制活性回收为35%,抑制比活为3 387 U/mg;40 kD组份的相应值分别为53%和3 116 U/mg.混合物的抑制活性回收和抑制比活分别为89%和3 076 U/mg,再经Superose-12或Superdex-75凝胶渗透层析,分别获得两种组份的纯产物.结论通过选择性洗脱亲和柱,可快速获得高收率、高纯度的人尿胰蛋白酶抑制剂.
目的以人尿濃縮物為原料,對人尿胰蛋白酶抑製劑的分離純化技術進行研究.方法利用純胰蛋白酶作為配體偶聯于CNBr-Sepharose-4B為親和載體,在不同條件下洗脫親和蛋白,可從粗品溶液中快速分離純化具有胰蛋白酶抑製活性的兩種純產物.結果層析圖譜與SDS-PAGE分析錶明,根據洗脫條件,可將有抑製活性的20 kD和40 kD蛋白質分離為兩箇單獨組份或混閤物.其中20 kD組份的抑製活性迴收為35%,抑製比活為3 387 U/mg;40 kD組份的相應值分彆為53%和3 116 U/mg.混閤物的抑製活性迴收和抑製比活分彆為89%和3 076 U/mg,再經Superose-12或Superdex-75凝膠滲透層析,分彆穫得兩種組份的純產物.結論通過選擇性洗脫親和柱,可快速穫得高收率、高純度的人尿胰蛋白酶抑製劑.
목적이인뇨농축물위원료,대인뇨이단백매억제제적분리순화기술진행연구.방법이용순이단백매작위배체우련우CNBr-Sepharose-4B위친화재체,재불동조건하세탈친화단백,가종조품용액중쾌속분리순화구유이단백매억제활성적량충순산물.결과층석도보여SDS-PAGE분석표명,근거세탈조건,가장유억제활성적20 kD화40 kD단백질분리위량개단독조빈혹혼합물.기중20 kD조빈적억제활성회수위35%,억제비활위3 387 U/mg;40 kD조빈적상응치분별위53%화3 116 U/mg.혼합물적억제활성회수화억제비활분별위89%화3 076 U/mg,재경Superose-12혹Superdex-75응효삼투층석,분별획득량충조빈적순산물.결론통과선택성세탈친화주,가쾌속획득고수솔、고순도적인뇨이단백매억제제.
