中国肺癌杂志
中國肺癌雜誌
중국폐암잡지
CHINESE JOURNAL OF LUNG CANCER
2008年
1期
46-50
,共5页
王海东%蒋耀光%林一丹%王如文%邓波
王海東%蔣耀光%林一丹%王如文%鄧波
왕해동%장요광%림일단%왕여문%산파
载体构建%肺肿瘤%siRNA%RNA干扰%FasL
載體構建%肺腫瘤%siRNA%RNA榦擾%FasL
재체구건%폐종류%siRNA%RNA간우%FasL
背景与目的 Fas/FasL是肿瘤坏死因子超家族成员,与肿瘤细胞的凋亡有关.激活的淋巴细胞由于FasL表达上调对于Fas/FasL凋亡途径非常敏感,从而可能被肿瘤细胞反杀伤攻击,使激活的淋巴细胞被清除掉.为研究FasL基因的功能及肺癌的基因治疗,构建了针对FasL基因的siRNA的表达载体,观察转染细胞A549后其对激活的T淋巴细胞的反杀伤作用.方法 利用网站选择适当位点设计并合成针对FasL基因mRNA的寡核苷酸序列,插入质粒pGCsi-U6中形成重组载体pSi-FasL.重组载体经测序鉴定后转染肺癌细胞A549,Western blot检测转染前后FasL蛋白的表达情况.结果 测序结果与所合成的寡核苷酸完全一致,证实成功构建了针对FasL基因的siRNA表达载体.Western blot检测显示转染肺癌细胞A549后有效抑制了FasL基因的表达.结论 针对FasL基因的siRNA表达载体成功构建,并能有效的抑制肺癌细胞A549中FasL基因的表达.
揹景與目的 Fas/FasL是腫瘤壞死因子超傢族成員,與腫瘤細胞的凋亡有關.激活的淋巴細胞由于FasL錶達上調對于Fas/FasL凋亡途徑非常敏感,從而可能被腫瘤細胞反殺傷攻擊,使激活的淋巴細胞被清除掉.為研究FasL基因的功能及肺癌的基因治療,構建瞭針對FasL基因的siRNA的錶達載體,觀察轉染細胞A549後其對激活的T淋巴細胞的反殺傷作用.方法 利用網站選擇適噹位點設計併閤成針對FasL基因mRNA的寡覈苷痠序列,插入質粒pGCsi-U6中形成重組載體pSi-FasL.重組載體經測序鑒定後轉染肺癌細胞A549,Western blot檢測轉染前後FasL蛋白的錶達情況.結果 測序結果與所閤成的寡覈苷痠完全一緻,證實成功構建瞭針對FasL基因的siRNA錶達載體.Western blot檢測顯示轉染肺癌細胞A549後有效抑製瞭FasL基因的錶達.結論 針對FasL基因的siRNA錶達載體成功構建,併能有效的抑製肺癌細胞A549中FasL基因的錶達.
배경여목적 Fas/FasL시종류배사인자초가족성원,여종류세포적조망유관.격활적림파세포유우FasL표체상조대우Fas/FasL조망도경비상민감,종이가능피종류세포반살상공격,사격활적림파세포피청제도.위연구FasL기인적공능급폐암적기인치료,구건료침대FasL기인적siRNA적표체재체,관찰전염세포A549후기대격활적T림파세포적반살상작용.방법 이용망참선택괄당위점설계병합성침대FasL기인mRNA적과핵감산서렬,삽입질립pGCsi-U6중형성중조재체pSi-FasL.중조재체경측서감정후전염폐암세포A549,Western blot검측전염전후FasL단백적표체정황.결과 측서결과여소합성적과핵감산완전일치,증실성공구건료침대FasL기인적siRNA표체재체.Western blot검측현시전염폐암세포A549후유효억제료FasL기인적표체.결론 침대FasL기인적siRNA표체재체성공구건,병능유효적억제폐암세포A549중FasL기인적표체.
