基于Mx启动子和荧光素酶报告基因定量检测鸡Ⅰ型干扰素生物学活性的研究
기우Mx계동자화형광소매보고기인정량검측계Ⅰ형간우소생물학활성적연구
Mx Promoter-Luciferase Reporter Gene Assay for the Quantification of Chicken Type ⅠInterferon
  • 万方数据
    畜牧兽医学报 축목수의학보

    2008年 1期 123-128 ,共6页

    陈伟业%葛金英%肇慧君%胡森%温志远%曹文雁%王喜军%黄克和%步志高

    진위업%갈금영%조혜군%호삼%온지원%조문안%왕희군%황극화%보지고

    鸡Ⅰ型干扰素%生物活性检测%鸡Mx启动子%萤光素酶 鷄Ⅰ型榦擾素%生物活性檢測%鷄Mx啟動子%螢光素酶
    계Ⅰ형간우소%생물활성검측%계Mx계동자%형광소매
    为了探索并建立快速、敏感、准确的Ⅰ型干扰素生物学活性定量分析方法,本研究克隆了鸡Mx启动子(Mxp),并在其下游连接荧光素酶(Luciferase,luc)报告基因,构建鸡Ⅰ型干扰素活性检测质粒pMxp-luc.以pMxp-luc瞬时转染鸡胚成纤维细胞系DF-1,24 h后用鸡IFN-α/β处理细胞,结果荧光素酶基因在Mx启动子的作用下获得转录表达;荧光素酶的表达量与干扰素的抗病毒活性有着良好的线性相关性,并在干扰素处理细胞6 h后就可以检测;对鸡IFN-α和IFN-β检测的敏感性分别约为抗病毒活性定量检测方法的10和100倍.该检测系统与传统抗病毒定量检测方法相比,具有快速简便、准确敏感、便于高通量检测等优势,在禽类乃至哺乳动物干扰素生物学基础和应用研究及产业化过程中具有重要应用价值.
    위료탐색병건립쾌속、민감、준학적Ⅰ형간우소생물학활성정량분석방법,본연구극륭료계Mx계동자(Mxp),병재기하유련접형광소매(Luciferase,luc)보고기인,구건계Ⅰ형간우소활성검측질립pMxp-luc.이pMxp-luc순시전염계배성섬유세포계DF-1,24 h후용계IFN-α/β처리세포,결과형광소매기인재Mx계동자적작용하획득전록표체;형광소매적표체량여간우소적항병독활성유착량호적선성상관성,병재간우소처리세포6 h후취가이검측;대계IFN-α화IFN-β검측적민감성분별약위항병독활성정량검측방법적10화100배.해검측계통여전통항병독정량검측방법상비,구유쾌속간편、준학민감、편우고통량검측등우세,재금류내지포유동물간우소생물학기출화응용연구급산업화과정중구유중요응용개치.
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