中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2008年
4期
42-46
,共5页
吾鲁木汗·孜尔别克%陈亮%卡马勒别克·吾买尔%严芳%恩特马克·布拉提白
吾魯木汗·孜爾彆剋%陳亮%卡馬勒彆剋·吾買爾%嚴芳%恩特馬剋·佈拉提白
오로목한·자이별극%진량%잡마륵별극·오매이%엄방%은특마극·포랍제백
禽多杀性巴氏杆菌%rCPM36%原核表达%抗原性
禽多殺性巴氏桿菌%rCPM36%原覈錶達%抗原性
금다살성파씨간균%rCPM36%원핵표체%항원성
目的:建立rCPM36在大肠杆菌中的表达体系,纯化表达产物并检测其抗原性.方法:运用PCR方法从禽多杀性巴氏杆菌国际标准株P1059基因组中扩增出编码36kDa成熟黏附蛋白的cpm36基因,构建原核表达载体pQE30-cpm36,转化到大肠杆菌M15中并诱导表达目的蛋白,用镍离子螯合层析柱纯化目的蛋白及制备其抗体,Western blot分析其抗原性.结果:SDS-PAGE结果显示目标蛋白以可溶性形式表达在大肠杆菌M15细胞质中,其相对分子质量为37kDa,Western blot结果表明表达蛋白具有良好的抗原性.结论:成功构建出原核表达载体并实现了目的蛋白表达,用镍离子螯合层析柱纯化得到具有抗原性的蛋白,为进一步开展禽多杀性巴氏杆菌黏附因子和保护性抗原的研究奠定基础.
目的:建立rCPM36在大腸桿菌中的錶達體繫,純化錶達產物併檢測其抗原性.方法:運用PCR方法從禽多殺性巴氏桿菌國際標準株P1059基因組中擴增齣編碼36kDa成熟黏附蛋白的cpm36基因,構建原覈錶達載體pQE30-cpm36,轉化到大腸桿菌M15中併誘導錶達目的蛋白,用鎳離子螯閤層析柱純化目的蛋白及製備其抗體,Western blot分析其抗原性.結果:SDS-PAGE結果顯示目標蛋白以可溶性形式錶達在大腸桿菌M15細胞質中,其相對分子質量為37kDa,Western blot結果錶明錶達蛋白具有良好的抗原性.結論:成功構建齣原覈錶達載體併實現瞭目的蛋白錶達,用鎳離子螯閤層析柱純化得到具有抗原性的蛋白,為進一步開展禽多殺性巴氏桿菌黏附因子和保護性抗原的研究奠定基礎.
목적:건립rCPM36재대장간균중적표체체계,순화표체산물병검측기항원성.방법:운용PCR방법종금다살성파씨간균국제표준주P1059기인조중확증출편마36kDa성숙점부단백적cpm36기인,구건원핵표체재체pQE30-cpm36,전화도대장간균M15중병유도표체목적단백,용얼리자오합층석주순화목적단백급제비기항체,Western blot분석기항원성.결과:SDS-PAGE결과현시목표단백이가용성형식표체재대장간균M15세포질중,기상대분자질량위37kDa,Western blot결과표명표체단백구유량호적항원성.결론:성공구건출원핵표체재체병실현료목적단백표체,용얼리자오합층석주순화득도구유항원성적단백,위진일보개전금다살성파씨간균점부인자화보호성항원적연구전정기출.
