东南大学学报（医学版）
東南大學學報（醫學版）
동남대학학보（의학판）
JOURNAL OF SOUTHEAST UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2008年
4期
255-258
,共4页
缪峰%吕雯雯%丁洁%袁榴娣
繆峰%呂雯雯%丁潔%袁榴娣
무봉%려문문%정길%원류제
Trio基因%原核表达%抗体制备
Trio基因%原覈錶達%抗體製備
Trio기인%원핵표체%항체제비
目的:制备兔抗果蝇Trio蛋白的抗体.方法:以RT-PCR扩增Trio的1 173 bp的基因片段并克隆入pET28a(+) 和pGEX-4T-1 (His)6C表达载体中,表达并纯化Trio-His、Trio-GST融合蛋白.用纯化的Trio-His融合蛋白免疫家兔产生抗Trio的抗体,用Trio-GST亲和层析法进行纯化并采用Western blot法检测抗体生物学活性.结果:表达的Trio-His蛋白以包涵体的形式存在,用His亲和层析法分离纯化后得到较纯的Trio-His融合蛋白,以纯化的Trio-His免疫家兔制备的兔抗Trio的抗体,经Western blot分析显示该抗体可与果蝇S2细胞Trio特异性结合.结论:获得具有良好特异性的兔抗Trio抗体,为进一步研究Trio的功能奠定了基础.
目的:製備兔抗果蠅Trio蛋白的抗體.方法:以RT-PCR擴增Trio的1 173 bp的基因片段併剋隆入pET28a(+) 和pGEX-4T-1 (His)6C錶達載體中,錶達併純化Trio-His、Trio-GST融閤蛋白.用純化的Trio-His融閤蛋白免疫傢兔產生抗Trio的抗體,用Trio-GST親和層析法進行純化併採用Western blot法檢測抗體生物學活性.結果:錶達的Trio-His蛋白以包涵體的形式存在,用His親和層析法分離純化後得到較純的Trio-His融閤蛋白,以純化的Trio-His免疫傢兔製備的兔抗Trio的抗體,經Western blot分析顯示該抗體可與果蠅S2細胞Trio特異性結閤.結論:穫得具有良好特異性的兔抗Trio抗體,為進一步研究Trio的功能奠定瞭基礎.
목적:제비토항과승Trio단백적항체.방법:이RT-PCR확증Trio적1 173 bp적기인편단병극륭입pET28a(+) 화pGEX-4T-1 (His)6C표체재체중,표체병순화Trio-His、Trio-GST융합단백.용순화적Trio-His융합단백면역가토산생항Trio적항체,용Trio-GST친화층석법진행순화병채용Western blot법검측항체생물학활성.결과:표체적Trio-His단백이포함체적형식존재,용His친화층석법분리순화후득도교순적Trio-His융합단백,이순화적Trio-His면역가토제비적토항Trio적항체,경Western blot분석현시해항체가여과승S2세포Trio특이성결합.결론:획득구유량호특이성적토항Trio항체,위진일보연구Trio적공능전정료기출.
