北方园艺
北方園藝
북방완예
NORTHERN HORTICULTURE
2011年
6期
133-136
,共4页
潘永明%张李华%李春彦%周岩
潘永明%張李華%李春彥%週巖
반영명%장리화%리춘언%주암
RNA干涉%黄瓜花叶病毒%基因转化%基因表达
RNA榦涉%黃瓜花葉病毒%基因轉化%基因錶達
RNA간섭%황과화협병독%기인전화%기인표체
以CMV(黄瓜花叶病毒)外壳蛋白基因为靶标基因,针对CMV 3个常见株系(普通株系、黄化株系和坏死株系)外壳蛋白基因间高度同源序列设计引物,经RT-PCR获得目的序列,构建RNA干涉双元载体(其中目的序列反向重复插入).以含双元栽体的根癌农杆菌介导转化无菌番茄苗,培育转基因番茄.人工接种CMV验证转基因番茄抗病毒能力,荧光定量PCR分析转基因番茄中外源基因的表达效果.结果表明:RNA干涉转基因番茄呈现不同程度的抗病毒能力;对表现抗病毒能力的转基因番茄进行荧光定量PCR分析显示,转基因番茄中靶标基因的转录mRNA存在一定程度的降解,且抗病毒能力与降解程度成正相关.
以CMV(黃瓜花葉病毒)外殼蛋白基因為靶標基因,針對CMV 3箇常見株繫(普通株繫、黃化株繫和壞死株繫)外殼蛋白基因間高度同源序列設計引物,經RT-PCR穫得目的序列,構建RNA榦涉雙元載體(其中目的序列反嚮重複插入).以含雙元栽體的根癌農桿菌介導轉化無菌番茄苗,培育轉基因番茄.人工接種CMV驗證轉基因番茄抗病毒能力,熒光定量PCR分析轉基因番茄中外源基因的錶達效果.結果錶明:RNA榦涉轉基因番茄呈現不同程度的抗病毒能力;對錶現抗病毒能力的轉基因番茄進行熒光定量PCR分析顯示,轉基因番茄中靶標基因的轉錄mRNA存在一定程度的降解,且抗病毒能力與降解程度成正相關.
이CMV(황과화협병독)외각단백기인위파표기인,침대CMV 3개상견주계(보통주계、황화주계화배사주계)외각단백기인간고도동원서렬설계인물,경RT-PCR획득목적서렬,구건RNA간섭쌍원재체(기중목적서렬반향중복삽입).이함쌍원재체적근암농간균개도전화무균번가묘,배육전기인번가.인공접충CMV험증전기인번가항병독능력,형광정량PCR분석전기인번가중외원기인적표체효과.결과표명:RNA간섭전기인번가정현불동정도적항병독능력;대표현항병독능력적전기인번가진행형광정량PCR분석현시,전기인번가중파표기인적전록mRNA존재일정정도적강해,차항병독능력여강해정도성정상관.
