复旦学报(医学版)
複旦學報(醫學版)
복단학보(의학판)
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2012年
4期
370-375
,共6页
隆霜%沈宜%谢莹珊%范维珂%姜蓉%陈黎
隆霜%瀋宜%謝瑩珊%範維珂%薑蓉%陳黎
륭상%침의%사형산%범유가%강용%진려
exosome%血管内皮生长因子(VEGF)%血管生成%乳腺癌
exosome%血管內皮生長因子(VEGF)%血管生成%乳腺癌
exosome%혈관내피생장인자(VEGF)%혈관생성%유선암
目的 研究人乳腺癌MDA-MB-231细胞源exosome对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)自分泌及体外成管作用的影响,探讨肿瘤细胞源exosome在肿瘤微环境中对血管内皮细胞血管生成的调控作用.方法 低温超速离心及密度梯度离心法提取乳腺癌MDA-MB-231细胞源exosome;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HUVEC与exosome共培养24 h后上清液中VEGF的变化水平;Western blot技术检测HUVEC与exosome共培养24 h后VEGF、VEGFR2及p-VEGFR2的蛋白表达情况;RT-PCR法检测HUVEC与exosome共培养24 h后VEGF的基因表达情况;观察HUVEC与exosome共培养24 h后的体外成管能力.结果 HUVEC与exosome共培养24 h后上清液中VEGF为(110.851±18.404)pg/mL,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示,HUVEC与exosome共培养24 h后VEGF和p-VEGFR2的蛋白表达水平均增加(P<0.05);RT-PCR结果显示,HUVEC与exosome共培养24 h后VEGF的基因表达水平增加(P<0.05);体外成管实验显示,exosome显著提高了HUVEC的管腔形成能力(P<0.05).结论 乳腺癌MDA-MB-231细胞源exosome促进了血管内皮细胞VEGF的表达及分泌,激活了血管内皮细胞VEGF/VEGFR2自分泌环并提高了血管内皮细胞的体外成管能力,对促肿瘤血管生成有一定的调控作用.
目的 研究人乳腺癌MDA-MB-231細胞源exosome對人臍靜脈內皮細胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)自分泌及體外成管作用的影響,探討腫瘤細胞源exosome在腫瘤微環境中對血管內皮細胞血管生成的調控作用.方法 低溫超速離心及密度梯度離心法提取乳腺癌MDA-MB-231細胞源exosome;酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測HUVEC與exosome共培養24 h後上清液中VEGF的變化水平;Western blot技術檢測HUVEC與exosome共培養24 h後VEGF、VEGFR2及p-VEGFR2的蛋白錶達情況;RT-PCR法檢測HUVEC與exosome共培養24 h後VEGF的基因錶達情況;觀察HUVEC與exosome共培養24 h後的體外成管能力.結果 HUVEC與exosome共培養24 h後上清液中VEGF為(110.851±18.404)pg/mL,與對照組相比差異具有統計學意義(P<0.05);Western blot結果顯示,HUVEC與exosome共培養24 h後VEGF和p-VEGFR2的蛋白錶達水平均增加(P<0.05);RT-PCR結果顯示,HUVEC與exosome共培養24 h後VEGF的基因錶達水平增加(P<0.05);體外成管實驗顯示,exosome顯著提高瞭HUVEC的管腔形成能力(P<0.05).結論 乳腺癌MDA-MB-231細胞源exosome促進瞭血管內皮細胞VEGF的錶達及分泌,激活瞭血管內皮細胞VEGF/VEGFR2自分泌環併提高瞭血管內皮細胞的體外成管能力,對促腫瘤血管生成有一定的調控作用.
목적 연구인유선암MDA-MB-231세포원exosome대인제정맥내피세포(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)혈관내피생장인자(vascular endothelial growth factor,VEGF)자분비급체외성관작용적영향,탐토종류세포원exosome재종류미배경중대혈관내피세포혈관생성적조공작용.방법 저온초속리심급밀도제도리심법제취유선암MDA-MB-231세포원exosome;매련면역흡부시험(ELISA)검측HUVEC여exosome공배양24 h후상청액중VEGF적변화수평;Western blot기술검측HUVEC여exosome공배양24 h후VEGF、VEGFR2급p-VEGFR2적단백표체정황;RT-PCR법검측HUVEC여exosome공배양24 h후VEGF적기인표체정황;관찰HUVEC여exosome공배양24 h후적체외성관능력.결과 HUVEC여exosome공배양24 h후상청액중VEGF위(110.851±18.404)pg/mL,여대조조상비차이구유통계학의의(P<0.05);Western blot결과현시,HUVEC여exosome공배양24 h후VEGF화p-VEGFR2적단백표체수평균증가(P<0.05);RT-PCR결과현시,HUVEC여exosome공배양24 h후VEGF적기인표체수평증가(P<0.05);체외성관실험현시,exosome현저제고료HUVEC적관강형성능력(P<0.05).결론 유선암MDA-MB-231세포원exosome촉진료혈관내피세포VEGF적표체급분비,격활료혈관내피세포VEGF/VEGFR2자분비배병제고료혈관내피세포적체외성관능력,대촉종류혈관생성유일정적조공작용.