CAJ | 학술논문

目的:观察具有活血化瘀、补气益肾、软坚散结作用的蜂贝化瘀胶囊对糖尿病大鼠糖脂代谢的干预以及微血管并发症的影响. 方法:实验于2001-07/2004-07在潍坊医学院分子免疫研究室完成.选用8周龄的清洁级健康雄性Wistar大鼠40只.①造模及分组:用0.1 mol/L枸橼酸钠缓冲液(pH 4.5)链脲佐菌素配成4.5g/L的溶液,按50 mg/kg单次腹腔注射,72 h后取大鼠尾静脉血查空腹血糖值达16.7 mmol/L的大鼠30只纳入实验.采用随机抽签法将大鼠分成2组:中药治疗组和糖尿病组,每组15只;同时另取与糖尿病大鼠体质量、鼠龄相匹配的健康大鼠15只作为正常对照组.②分组干预:中药治疗组:饲料中加用蜂贝化瘀胶囊中的粉末(蜂胶、丹参、葛根、贝母、生地、菟丝子、黄精及黄芪等),以21.6 g/kg喂养10周.糖尿病组及对照组:普通饲料喂服大鼠10周.③生物化学指标的测定:血浆醛糖还原酶活性测定:参照Vander等方法测定血浆醛糖还原酶的辅酶-还原型辅酶2的吸光度示醛糖还原酶活性.尿蛋白测定采用改良Lowry法.全血糖化血红蛋白含量测定:采用微柱亲和层析法.血脂测定:总胆固醇和三酰甘油测定均采用酶法.血清脂质过氧化物含量测定:脂质过氧化降解产物丙二醛含量,采用721分光光度计,按试剂盒说明测定.24 h尿蛋白测定:采用考马斯亮蓝法.按Green等方法用Greiss试剂测一氧化氮的代谢产物亚硝酸盐含量,间接反映一氧化氮含量.④血管平滑肌细胞3H-胸腺嘧啶核苷掺入率测定:以液闪仪测定各组血管平滑肌细胞的3H-胸腺嘧啶核苷掺入率,反映血管平滑肌细胞内的DNA合成量.⑤形态学观察:分别对肾脏和眼球切片进行苏木精-伊红和过碘酸-Schiff染色,光镜下观察肾脏及视网膜病理改变.制备肾脏和视网膜组织超薄切片,乙酸双氧铀和枸橼酸铅染色,透射电镜观察肾脏及视网膜超微结构的改变.⑥用t检验比较组间差异. 结果:纳入大鼠55只,其中10只造模失败被剔除,进入结果分析45只.①血糖、总胆固醇及丙二醛水平:中药治疗组均明显低于糖尿病组(t=4.15,2.38,2.35,P＜0.05～0.01),与正常对照组差异不明显(P＞0.05);糖尿病组均明显高于正常对照组(t=2.77～5.20,P＜0.05～0.01).②血醛糖还原酶活性、糖化血红蛋白和尿蛋白含量:中药治疗组明显低于糖尿病组(t=2.35～5.03,P＜0.05～0.01),糖尿病组明显高于正常对照组(t=4.05,4.22,5.19,P＜0.01);血浆亚硝酸盐含量:中药治疗组明显高于糖尿病组(t=2.21,P＜0.05),糖尿病组明显低于正常对照组(t=2.62,P＜0.05).③血管平滑肌细胞内3H-胸腺嘧啶核苷掺入率:中药治疗组明显低于糖尿病组[(11 891±1 386),(12 729±1 438)min-1,t=2.23,P＜0.05],而与正常对照组差异不明显[(10 909±1 255)min-1,P＞0.05].④形态学观察结果:糖尿病组大鼠肾脏结构和血管、视网膜血管均有炎性浸润性增生改变;中药治疗组其病理改变较糖尿病组明显减轻. 结论:蜂贝化瘀胶囊可改善糖尿病大鼠各项代谢指标,且能明显减轻其肾及视网膜微血管并发症. 目的:觀察具有活血化瘀、補氣益腎、軟堅散結作用的蜂貝化瘀膠囊對糖尿病大鼠糖脂代謝的榦預以及微血管併髮癥的影響. 方法:實驗于2001-07/2004-07在濰坊醫學院分子免疫研究室完成.選用8週齡的清潔級健康雄性Wistar大鼠40隻.①造模及分組:用0.1 mol/L枸櫞痠鈉緩遲液(pH 4.5)鏈脲佐菌素配成4.5g/L的溶液,按50 mg/kg單次腹腔註射,72 h後取大鼠尾靜脈血查空腹血糖值達16.7 mmol/L的大鼠30隻納入實驗.採用隨機抽籤法將大鼠分成2組:中藥治療組和糖尿病組,每組15隻;同時另取與糖尿病大鼠體質量、鼠齡相匹配的健康大鼠15隻作為正常對照組.②分組榦預:中藥治療組:飼料中加用蜂貝化瘀膠囊中的粉末(蜂膠、丹參、葛根、貝母、生地、菟絲子、黃精及黃芪等),以21.6 g/kg餵養10週.糖尿病組及對照組:普通飼料餵服大鼠10週.③生物化學指標的測定:血漿醛糖還原酶活性測定:參照Vander等方法測定血漿醛糖還原酶的輔酶-還原型輔酶2的吸光度示醛糖還原酶活性.尿蛋白測定採用改良Lowry法.全血糖化血紅蛋白含量測定:採用微柱親和層析法.血脂測定:總膽固醇和三酰甘油測定均採用酶法.血清脂質過氧化物含量測定:脂質過氧化降解產物丙二醛含量,採用721分光光度計,按試劑盒說明測定.24 h尿蛋白測定:採用攷馬斯亮藍法.按Green等方法用Greiss試劑測一氧化氮的代謝產物亞硝痠鹽含量,間接反映一氧化氮含量.④血管平滑肌細胞3H-胸腺嘧啶覈苷摻入率測定:以液閃儀測定各組血管平滑肌細胞的3H-胸腺嘧啶覈苷摻入率,反映血管平滑肌細胞內的DNA閤成量.⑤形態學觀察:分彆對腎髒和眼毬切片進行囌木精-伊紅和過碘痠-Schiff染色,光鏡下觀察腎髒及視網膜病理改變.製備腎髒和視網膜組織超薄切片,乙痠雙氧鈾和枸櫞痠鉛染色,透射電鏡觀察腎髒及視網膜超微結構的改變.⑥用t檢驗比較組間差異. 結果:納入大鼠55隻,其中10隻造模失敗被剔除,進入結果分析45隻.①血糖、總膽固醇及丙二醛水平:中藥治療組均明顯低于糖尿病組(t=4.15,2.38,2.35,P＜0.05～0.01),與正常對照組差異不明顯(P＞0.05);糖尿病組均明顯高于正常對照組(t=2.77～5.20,P＜0.05～0.01).②血醛糖還原酶活性、糖化血紅蛋白和尿蛋白含量:中藥治療組明顯低于糖尿病組(t=2.35～5.03,P＜0.05～0.01),糖尿病組明顯高于正常對照組(t=4.05,4.22,5.19,P＜0.01);血漿亞硝痠鹽含量:中藥治療組明顯高于糖尿病組(t=2.21,P＜0.05),糖尿病組明顯低于正常對照組(t=2.62,P＜0.05).③血管平滑肌細胞內3H-胸腺嘧啶覈苷摻入率:中藥治療組明顯低于糖尿病組[(11 891±1 386),(12 729±1 438)min-1,t=2.23,P＜0.05],而與正常對照組差異不明顯[(10 909±1 255)min-1,P＞0.05].④形態學觀察結果:糖尿病組大鼠腎髒結構和血管、視網膜血管均有炎性浸潤性增生改變;中藥治療組其病理改變較糖尿病組明顯減輕. 結論:蜂貝化瘀膠囊可改善糖尿病大鼠各項代謝指標,且能明顯減輕其腎及視網膜微血管併髮癥.
목적:관찰구유활혈화어、보기익신、연견산결작용적봉패화어효낭대당뇨병대서당지대사적간예이급미혈관병발증적영향. 방법:실험우2001-07/2004-07재유방의학원분자면역연구실완성.선용8주령적청길급건강웅성Wistar대서40지.①조모급분조:용0.1 mol/L구연산납완충액(pH 4.5)련뇨좌균소배성4.5g/L적용액,안50 mg/kg단차복강주사,72 h후취대서미정맥혈사공복혈당치체16.7 mmol/L적대서30지납입실험.채용수궤추첨법장대서분성2조:중약치료조화당뇨병조,매조15지;동시령취여당뇨병대서체질량、서령상필배적건강대서15지작위정상대조조.②분조간예:중약치료조:사료중가용봉패화어효낭중적분말(봉효、단삼、갈근、패모、생지、토사자、황정급황기등),이21.6 g/kg위양10주.당뇨병조급대조조:보통사료위복대서10주.③생물화학지표적측정:혈장철당환원매활성측정:삼조Vander등방법측정혈장철당환원매적보매-환원형보매2적흡광도시철당환원매활성.뇨단백측정채용개량Lowry법.전혈당화혈홍단백함량측정:채용미주친화층석법.혈지측정:총담고순화삼선감유측정균채용매법.혈청지질과양화물함량측정:지질과양화강해산물병이철함량,채용721분광광도계,안시제합설명측정.24 h뇨단백측정:채용고마사량람법.안Green등방법용Greiss시제측일양화담적대사산물아초산염함량,간접반영일양화담함량.④혈관평활기세포3H-흉선밀정핵감참입솔측정:이액섬의측정각조혈관평활기세포적3H-흉선밀정핵감참입솔,반영혈관평활기세포내적DNA합성량.⑤형태학관찰:분별대신장화안구절편진행소목정-이홍화과전산-Schiff염색,광경하관찰신장급시망막병리개변.제비신장화시망막조직초박절편,을산쌍양유화구연산연염색,투사전경관찰신장급시망막초미결구적개변.⑥용t검험비교조간차이. 결과:납입대서55지,기중10지조모실패피척제,진입결과분석45지.①혈당、총담고순급병이철수평:중약치료조균명현저우당뇨병조(t=4.15,2.38,2.35,P＜0.05～0.01),여정상대조조차이불명현(P＞0.05);당뇨병조균명현고우정상대조조(t=2.77～5.20,P＜0.05～0.01).②혈철당환원매활성、당화혈홍단백화뇨단백함량:중약치료조명현저우당뇨병조(t=2.35～5.03,P＜0.05～0.01),당뇨병조명현고우정상대조조(t=4.05,4.22,5.19,P＜0.01);혈장아초산염함량:중약치료조명현고우당뇨병조(t=2.21,P＜0.05),당뇨병조명현저우정상대조조(t=2.62,P＜0.05).③혈관평활기세포내3H-흉선밀정핵감참입솔:중약치료조명현저우당뇨병조[(11 891±1 386),(12 729±1 438)min-1,t=2.23,P＜0.05],이여정상대조조차이불명현[(10 909±1 255)min-1,P＞0.05].④형태학관찰결과:당뇨병조대서신장결구화혈관、시망막혈관균유염성침윤성증생개변;중약치료조기병리개변교당뇨병조명현감경. 결론:봉패화어효낭가개선당뇨병대서각항대사지표,차능명현감경기신급시망막미혈관병발증.