重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2008年
5期
536-540
,共5页
冀慧莹%吴绮思%郭永灿%吕纯芳%赵培%罗春丽
冀慧瑩%吳綺思%郭永燦%呂純芳%趙培%囉春麗
기혜형%오기사%곽영찬%려순방%조배%라춘려
RNA干扰%膀胱癌%Crocin%增殖
RNA榦擾%膀胱癌%Crocin%增殖
RNA간우%방광암%Crocin%증식
目的:观察RNAi沉默膀胱癌BIU-87细胞磷脂酶C-ε(Phospholipase C epsilon,PLCε)表达后对藏花素(Crocin)抑制人膀胱癌BIU-87细胞增殖作用的影响.方法:将携有siRNA基因的真核表达质粒PGenesil-PLC?转染BIU-87细胞后,分为5组:未转染组、pGenesil-NP阴性质粒组、pGenesil-PLC ε质粒组、Crocin组、pGenesil-PLCε联合Crocin组.MTT法观察不同处理组对BIU-87细胞的生长抑制作用.RT-PCR法检测转染后对PLCε mRNA表达的影响及各处理组PCNA(Proliferating cellnuclear antigen)、CyclinD1 mRNA表达.Western-blot检测PCNA、CyclinD1蛋白表达.结果:RNAi可抑制BIU-87细胞78.06%的PLCεmRNA表达.pGenesil-PLCε联合Crocin组可增强Crocin对BIU-87细胞的生长抑制作用,48h抑制率达45.30%,且与pGenesil-PLCε质粒组和Crocin组相比较有显著性差异(P<0.01).RT-PCR和Western-blot结果显示与RNAi沉默PLCε组比较,RNAi PLC?联合Crocin组明显下调了PCNA、Cyclin D1基因和蛋白的表达(P<0.05);较单独Crocin组比较,RNAiPLC ε联合Crocin组显著降低了PCNA基因和蛋白的表达(P<0.05),降低了Cyclin D1蛋白的表达(P<0.05),Cyclin D1 mRNA表达变化两组间无显著性差异(P>0.05).结论:沉默PLC ?基因可增强Crocin对BIU-87细胞的抑制作用,其机制与进一步下调PCNA、CyclinD1的表达有关.
目的:觀察RNAi沉默膀胱癌BIU-87細胞燐脂酶C-ε(Phospholipase C epsilon,PLCε)錶達後對藏花素(Crocin)抑製人膀胱癌BIU-87細胞增殖作用的影響.方法:將攜有siRNA基因的真覈錶達質粒PGenesil-PLC?轉染BIU-87細胞後,分為5組:未轉染組、pGenesil-NP陰性質粒組、pGenesil-PLC ε質粒組、Crocin組、pGenesil-PLCε聯閤Crocin組.MTT法觀察不同處理組對BIU-87細胞的生長抑製作用.RT-PCR法檢測轉染後對PLCε mRNA錶達的影響及各處理組PCNA(Proliferating cellnuclear antigen)、CyclinD1 mRNA錶達.Western-blot檢測PCNA、CyclinD1蛋白錶達.結果:RNAi可抑製BIU-87細胞78.06%的PLCεmRNA錶達.pGenesil-PLCε聯閤Crocin組可增彊Crocin對BIU-87細胞的生長抑製作用,48h抑製率達45.30%,且與pGenesil-PLCε質粒組和Crocin組相比較有顯著性差異(P<0.01).RT-PCR和Western-blot結果顯示與RNAi沉默PLCε組比較,RNAi PLC?聯閤Crocin組明顯下調瞭PCNA、Cyclin D1基因和蛋白的錶達(P<0.05);較單獨Crocin組比較,RNAiPLC ε聯閤Crocin組顯著降低瞭PCNA基因和蛋白的錶達(P<0.05),降低瞭Cyclin D1蛋白的錶達(P<0.05),Cyclin D1 mRNA錶達變化兩組間無顯著性差異(P>0.05).結論:沉默PLC ?基因可增彊Crocin對BIU-87細胞的抑製作用,其機製與進一步下調PCNA、CyclinD1的錶達有關.
목적:관찰RNAi침묵방광암BIU-87세포린지매C-ε(Phospholipase C epsilon,PLCε)표체후대장화소(Crocin)억제인방광암BIU-87세포증식작용적영향.방법:장휴유siRNA기인적진핵표체질립PGenesil-PLC?전염BIU-87세포후,분위5조:미전염조、pGenesil-NP음성질립조、pGenesil-PLC ε질립조、Crocin조、pGenesil-PLCε연합Crocin조.MTT법관찰불동처리조대BIU-87세포적생장억제작용.RT-PCR법검측전염후대PLCε mRNA표체적영향급각처리조PCNA(Proliferating cellnuclear antigen)、CyclinD1 mRNA표체.Western-blot검측PCNA、CyclinD1단백표체.결과:RNAi가억제BIU-87세포78.06%적PLCεmRNA표체.pGenesil-PLCε연합Crocin조가증강Crocin대BIU-87세포적생장억제작용,48h억제솔체45.30%,차여pGenesil-PLCε질립조화Crocin조상비교유현저성차이(P<0.01).RT-PCR화Western-blot결과현시여RNAi침묵PLCε조비교,RNAi PLC?연합Crocin조명현하조료PCNA、Cyclin D1기인화단백적표체(P<0.05);교단독Crocin조비교,RNAiPLC ε연합Crocin조현저강저료PCNA기인화단백적표체(P<0.05),강저료Cyclin D1단백적표체(P<0.05),Cyclin D1 mRNA표체변화량조간무현저성차이(P>0.05).결론:침묵PLC ?기인가증강Crocin대BIU-87세포적억제작용,기궤제여진일보하조PCNA、CyclinD1적표체유관.
