微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2008年
9期
1192-1197
,共6页
韩冬梅%班慧芳%余子全%喻子牛%孙明
韓鼕梅%班慧芳%餘子全%喻子牛%孫明
한동매%반혜방%여자전%유자우%손명
枯草芽胞杆菌%抑菌蛋白%抑菌谱%性质鉴定
枯草芽胞桿菌%抑菌蛋白%抑菌譜%性質鑒定
고초아포간균%억균단백%억균보%성질감정
[目的]魔芋软腐病是一种由胡萝卜软腐欧文氏菌引起的病害,严重影响了魔芋产业的发展.枯草芽胞杆菌BSn5所产生的蛋白APn5对胡萝卜欧文氏菌具有良好的抑菌效果,本文将对该蛋白进行鉴定和性质分析.[方法]用饱和度为30%的硫酸铵沉淀和超滤离心的方法从枯草芽胞杆菌BSn5的发酵上清液中分离纯化APn5蛋白.以滤纸片法检测APn5蛋白的抑菌谱.用不同的温度、pH条件和蛋白酶处理APn5蛋白,并检测其抑菌活性变化.测定菌株BSn5的生长周期,同步检测其发酵上清液的抑菌活性.利用基质协助激光解吸附离子化-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和电喷雾四极杆飞行时间串联质谱(Q-TOF)分析APn5蛋白.[结果]APn5蛋白对于魔芋软腐病菌具有较好的抑菌活性,抑菌谱较窄,主要对细菌性植物病原菌具有较强的抑制作用;对高温敏感,对蛋白酶E敏感,对蛋白酶K和胰蛋白酶部分敏感;在酸性环境下其抑菌活性稳定,碱性环境下活性不稳定.在菌株BSn5的生长周期中,该蛋白的抑菌活性不能稳定存在,其发酵上清液在对数生长期抑菌活性逐渐升高,进入稳定期后抑菌活性开始下降,直至完全消失.质谱分析未发现其与已知蛋白具有高度相关性.[结论]APn5蛋白具有不同于已报道的枯草芽胞杆菌所产生的抑菌物质的性质,推测为一种新型的抑菌蛋白.
[目的]魔芋軟腐病是一種由鬍蘿蔔軟腐歐文氏菌引起的病害,嚴重影響瞭魔芋產業的髮展.枯草芽胞桿菌BSn5所產生的蛋白APn5對鬍蘿蔔歐文氏菌具有良好的抑菌效果,本文將對該蛋白進行鑒定和性質分析.[方法]用飽和度為30%的硫痠銨沉澱和超濾離心的方法從枯草芽胞桿菌BSn5的髮酵上清液中分離純化APn5蛋白.以濾紙片法檢測APn5蛋白的抑菌譜.用不同的溫度、pH條件和蛋白酶處理APn5蛋白,併檢測其抑菌活性變化.測定菌株BSn5的生長週期,同步檢測其髮酵上清液的抑菌活性.利用基質協助激光解吸附離子化-飛行時間質譜(MALDI-TOF-MS)和電噴霧四極桿飛行時間串聯質譜(Q-TOF)分析APn5蛋白.[結果]APn5蛋白對于魔芋軟腐病菌具有較好的抑菌活性,抑菌譜較窄,主要對細菌性植物病原菌具有較彊的抑製作用;對高溫敏感,對蛋白酶E敏感,對蛋白酶K和胰蛋白酶部分敏感;在痠性環境下其抑菌活性穩定,堿性環境下活性不穩定.在菌株BSn5的生長週期中,該蛋白的抑菌活性不能穩定存在,其髮酵上清液在對數生長期抑菌活性逐漸升高,進入穩定期後抑菌活性開始下降,直至完全消失.質譜分析未髮現其與已知蛋白具有高度相關性.[結論]APn5蛋白具有不同于已報道的枯草芽胞桿菌所產生的抑菌物質的性質,推測為一種新型的抑菌蛋白.
[목적]마우연부병시일충유호라복연부구문씨균인기적병해,엄중영향료마우산업적발전.고초아포간균BSn5소산생적단백APn5대호라복구문씨균구유량호적억균효과,본문장대해단백진행감정화성질분석.[방법]용포화도위30%적류산안침정화초려리심적방법종고초아포간균BSn5적발효상청액중분리순화APn5단백.이려지편법검측APn5단백적억균보.용불동적온도、pH조건화단백매처리APn5단백,병검측기억균활성변화.측정균주BSn5적생장주기,동보검측기발효상청액적억균활성.이용기질협조격광해흡부리자화-비행시간질보(MALDI-TOF-MS)화전분무사겁간비행시간천련질보(Q-TOF)분석APn5단백.[결과]APn5단백대우마우연부병균구유교호적억균활성,억균보교착,주요대세균성식물병원균구유교강적억제작용;대고온민감,대단백매E민감,대단백매K화이단백매부분민감;재산성배경하기억균활성은정,감성배경하활성불은정.재균주BSn5적생장주기중,해단백적억균활성불능은정존재,기발효상청액재대수생장기억균활성축점승고,진입은정기후억균활성개시하강,직지완전소실.질보분석미발현기여이지단백구유고도상관성.[결론]APn5단백구유불동우이보도적고초아포간균소산생적억균물질적성질,추측위일충신형적억균단백.
