农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2009年
2期
201-205
,共5页
重组N蛋白%猪传染性胃肠炎抗体%间接ELISA
重組N蛋白%豬傳染性胃腸炎抗體%間接ELISA
중조N단백%저전염성위장염항체%간접ELISA
重组质粒PET-N转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21菌株,在1.0 mmol/L IPTG 37℃条件下诱导,外源基因获得高效表达.Western blot检测证明,表达产物具有良好的反应原性.以纯化的蛋白为抗原建立了检测猪传染性胃肠炎抗体的间接ELISA方法,确定抗原最佳包被浓度为15μg/mL,抗体稀释度1:40,最适封闭液为5%FBS,血清反应时间为90min,酶标二抗HRP SPA的工作浓度为1:5000,反应时间为60 min,底物在室温显色时间为10 min,待检血清阳性标准定为光密度OD450≥0.35.与Svanova TGEV/PRCV抗体诊断试剂盒比较,此方法的特异性、敏感性和符合率分别为93.8%、93.5%和93.5%.
重組質粒PET-N轉化大腸桿菌(Escherichia coli)BL21菌株,在1.0 mmol/L IPTG 37℃條件下誘導,外源基因穫得高效錶達.Western blot檢測證明,錶達產物具有良好的反應原性.以純化的蛋白為抗原建立瞭檢測豬傳染性胃腸炎抗體的間接ELISA方法,確定抗原最佳包被濃度為15μg/mL,抗體稀釋度1:40,最適封閉液為5%FBS,血清反應時間為90min,酶標二抗HRP SPA的工作濃度為1:5000,反應時間為60 min,底物在室溫顯色時間為10 min,待檢血清暘性標準定為光密度OD450≥0.35.與Svanova TGEV/PRCV抗體診斷試劑盒比較,此方法的特異性、敏感性和符閤率分彆為93.8%、93.5%和93.5%.
중조질립PET-N전화대장간균(Escherichia coli)BL21균주,재1.0 mmol/L IPTG 37℃조건하유도,외원기인획득고효표체.Western blot검측증명,표체산물구유량호적반응원성.이순화적단백위항원건립료검측저전염성위장염항체적간접ELISA방법,학정항원최가포피농도위15μg/mL,항체희석도1:40,최괄봉폐액위5%FBS,혈청반응시간위90min,매표이항HRP SPA적공작농도위1:5000,반응시간위60 min,저물재실온현색시간위10 min,대검혈청양성표준정위광밀도OD450≥0.35.여Svanova TGEV/PRCV항체진단시제합비교,차방법적특이성、민감성화부합솔분별위93.8%、93.5%화93.5%.
