华南农业大学学报
華南農業大學學報
화남농업대학학보
JOURNAL OF SOUTH CHINA AGRICULTURAL UNIVERSITY
2012年
2期
192-196,202
,共6页
姜敬哲%张彬彬%张远%苏友禄%王江勇
薑敬哲%張彬彬%張遠%囌友祿%王江勇
강경철%장빈빈%장원%소우록%왕강용
杂色鲍%Fosmid%基因组文库%血蓝蛋白%文库筛选
雜色鮑%Fosmid%基因組文庫%血藍蛋白%文庫篩選
잡색포%Fosmid%기인조문고%혈람단백%문고사선
以杂色鲍Haliotis diversicolor肌肉组织为材料,按照CopyControlTM Fosmid Library Production Kit中方法构建了杂色鲍Fosmid全基因组文库.从文库中随机挑取50个克隆进行NotⅠ酶切鉴定发现,阳性率达到100％,插入片段大小分布在32 ～48 kb之间,平均长度约37.6 kb.随机挑取8个克隆进行正、反向末端测序,获得了全部16个测序结果,其中8条序列确定为鲍来源基因序列.进一步根据杂色鲍血蓝蛋白(Hemocyanin)基因3 ’端序列设计特异引物,用PCR方法对基因组文库进行筛选,获得一个阳性克隆,经Primer-Walking测序、Blast比对和进化分析证实,该序列为杂色鲍血蓝蛋白Ⅱ型基因克隆.
以雜色鮑Haliotis diversicolor肌肉組織為材料,按照CopyControlTM Fosmid Library Production Kit中方法構建瞭雜色鮑Fosmid全基因組文庫.從文庫中隨機挑取50箇剋隆進行NotⅠ酶切鑒定髮現,暘性率達到100％,插入片段大小分佈在32 ～48 kb之間,平均長度約37.6 kb.隨機挑取8箇剋隆進行正、反嚮末耑測序,穫得瞭全部16箇測序結果,其中8條序列確定為鮑來源基因序列.進一步根據雜色鮑血藍蛋白(Hemocyanin)基因3 ’耑序列設計特異引物,用PCR方法對基因組文庫進行篩選,穫得一箇暘性剋隆,經Primer-Walking測序、Blast比對和進化分析證實,該序列為雜色鮑血藍蛋白Ⅱ型基因剋隆.
이잡색포Haliotis diversicolor기육조직위재료,안조CopyControlTM Fosmid Library Production Kit중방법구건료잡색포Fosmid전기인조문고.종문고중수궤도취50개극륭진행NotⅠ매절감정발현,양성솔체도100％,삽입편단대소분포재32 ～48 kb지간,평균장도약37.6 kb.수궤도취8개극륭진행정、반향말단측서,획득료전부16개측서결과,기중8조서렬학정위포래원기인서렬.진일보근거잡색포혈람단백(Hemocyanin)기인3 ’단서렬설계특이인물,용PCR방법대기인조문고진행사선,획득일개양성극륭,경Primer-Walking측서、Blast비대화진화분석증실,해서렬위잡색포혈람단백Ⅱ형기인극륭.
