中南林业科技大学学报
中南林業科技大學學報
중남임업과기대학학보
JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY OF FORESTRY & TECHNOLOGY
2012年
5期
144-148
,共5页
郑斯竹%安榆林%徐梅%杨晓军%常虹%嵇保中
鄭斯竹%安榆林%徐梅%楊曉軍%常虹%嵇保中
정사죽%안유림%서매%양효군%상홍%혜보중
松墨大牛%天牛幼虫%保存方式%DNA提取%磁珠法
鬆墨大牛%天牛幼蟲%保存方式%DNA提取%磁珠法
송묵대우%천우유충%보존방식%DNA제취%자주법
为了开展天牛科昆虫分子系统学研究,采用酚-氯仿提取法、TakaraDNA快速提取试剂盒及GenMagBio动物细胞组织/细胞基因组DNA磁珠提取试剂盒3种方法分别对75％乙醇常温保存、无水乙醇-20℃冷藏保存和活体4℃保存3种保存方式且保存时间1年以上的松墨天牛幼虫进行DNA提取,并对不同提取方法所获取的DNA纯度与质量进行分析比较,确定了长时间保存天牛幼虫以无水乙醇浸渍-20℃冷藏保存效果最佳,而用GenMagBio磁珠法提取试剂盒提取DNA出现降解的标本提取效果最好.应用GenMagBio磁珠提取试剂盒对实验室保存多年的天牛幼虫标本进行DNA提取,并对提取DNA是否适合后续的PCR扩增及DNA序列测定进行了实验验证,结果符合预期.
為瞭開展天牛科昆蟲分子繫統學研究,採用酚-氯倣提取法、TakaraDNA快速提取試劑盒及GenMagBio動物細胞組織/細胞基因組DNA磁珠提取試劑盒3種方法分彆對75％乙醇常溫保存、無水乙醇-20℃冷藏保存和活體4℃保存3種保存方式且保存時間1年以上的鬆墨天牛幼蟲進行DNA提取,併對不同提取方法所穫取的DNA純度與質量進行分析比較,確定瞭長時間保存天牛幼蟲以無水乙醇浸漬-20℃冷藏保存效果最佳,而用GenMagBio磁珠法提取試劑盒提取DNA齣現降解的標本提取效果最好.應用GenMagBio磁珠提取試劑盒對實驗室保存多年的天牛幼蟲標本進行DNA提取,併對提取DNA是否適閤後續的PCR擴增及DNA序列測定進行瞭實驗驗證,結果符閤預期.
위료개전천우과곤충분자계통학연구,채용분-록방제취법、TakaraDNA쾌속제취시제합급GenMagBio동물세포조직/세포기인조DNA자주제취시제합3충방법분별대75％을순상온보존、무수을순-20℃랭장보존화활체4℃보존3충보존방식차보존시간1년이상적송묵천우유충진행DNA제취,병대불동제취방법소획취적DNA순도여질량진행분석비교,학정료장시간보존천우유충이무수을순침지-20℃랭장보존효과최가,이용GenMagBio자주법제취시제합제취DNA출현강해적표본제취효과최호.응용GenMagBio자주제취시제합대실험실보존다년적천우유충표본진행DNA제취,병대제취DNA시부괄합후속적PCR확증급DNA서렬측정진행료실험험증,결과부합예기.
