CAJ | 학술논문

目的:观察猕猴骨髓间质于细胞的诱导分化及其对损伤脊髓功能恢复的影响.方法:实验于2004-09/2007-01在中山大学实验动物中心完成,选用健康雄性恒河猴10只.①将体外分离传代获得的猕猴骨髓间质干细胞中加入Hoechst33342标记液,然后应用隐丹参酮进行诱导分化.②按照改良Allen氏法制作猕猴脊髓损伤模型,按随机数字表法分为2组,实验组(n=5)在脊髓损伤处头尾两端注射已初步诱导的猴骨髓间质干细胞,对照组(n=5)注射磷酸盐缓冲液.③细胞移植后1周至3个月,采用Tarlov评分方法(0～4级)评价猴损伤脊髓的功能恢复情况:0级为肢体完全瘫痪;4级为正常.④采用True blue逆行追踪实验评估轴突通路的再建情况.⑤移植术后3个月处死动物,将脊髓组织经苏木精-伊红染色后行组织学观察.结果:实验组5只动物均进入结果分析,对照组2只进入结果分析.①猴骨髓间质干细胞诱导分化半小时后,神经元样细胞的胞体和轴突呈神经元特异性烯醇化酶强阳性表达.细胞移植3个月后,实验组猴子的脊髓损伤段冰冻切片中有大量Hoechst33342 标记阳性的细胞.②实验组术后1周起即可见动物双下肢有轻微动作,至2个月左右,猴子的脊髓功能基本得以稳定,此时Tarlov评分介于2级与3级之间.与实验组相比,对照组动物脊髓功能无恢复.③实验组可见脊髓组织形态完整,细胞无变性衰亡.④实验组动物的胸段脊髓和大脑感觉运动区的冰冻切片上均发现了True blue标记阳性的细胞.结论:骨髓间质干细胞来源的神经元能够促进脊髓损伤猕猴的运动功能恢复.
목적:관찰미후골수간질우세포적유도분화급기대손상척수공능회복적영향.방법:실험우2004-09/2007-01재중산대학실험동물중심완성,선용건강웅성항하후10지.①장체외분리전대획득적미후골수간질간세포중가입Hoechst33342표기액,연후응용은단삼동진행유도분화.②안조개량Allen씨법제작미후척수손상모형,안수궤수자표법분위2조,실험조(n=5)재척수손상처두미량단주사이초보유도적후골수간질간세포,대조조(n=5)주사린산염완충액.③세포이식후1주지3개월,채용Tarlov평분방법(0～4급)평개후손상척수적공능회복정황:0급위지체완전탄탄;4급위정상.④채용True blue역행추종실험평고축돌통로적재건정황.⑤이식술후3개월처사동물,장척수조직경소목정-이홍염색후행조직학관찰.결과:실험조5지동물균진입결과분석,대조조2지진입결과분석.①후골수간질간세포유도분화반소시후,신경원양세포적포체화축돌정신경원특이성희순화매강양성표체.세포이식3개월후,실험조후자적척수손상단빙동절편중유대량Hoechst33342 표기양성적세포.②실험조술후1주기즉가견동물쌍하지유경미동작,지2개월좌우,후자적척수공능기본득이은정,차시Tarlov평분개우2급여3급지간.여실험조상비,대조조동물척수공능무회복.③실험조가견척수조직형태완정,세포무변성쇠망.④실험조동물적흉단척수화대뇌감각운동구적빙동절편상균발현료True blue표기양성적세포.결론:골수간질간세포래원적신경원능구촉진척수손상미후적운동공능회복.