H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的克隆及表达
H5N1아형금류감병독NS1기인적극륭급표체
Cloning and expression of NS1 gene of H5N1 avian influenza virus
  • 万方数据
    中国兽医科技 중국수의과기
    CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE AND TECHNOLOGY
    2005年 12期 942-945 ,共4页

    刘仁陆%周佩娇%朱事康%任涛%戴应基%李炳清%曹伟胜%罗卓军%程珏益%郑世萍%廖明

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    禽流感病毒%H5N1亚型%NS1基因%克隆%表达 禽流感病毒%H5N1亞型%NS1基因%剋隆%錶達
    금류감병독%H5N1아형%NS1기인%극륭%표체
    利用RT-PCR扩增了2株H5N1亚型禽流感病毒NS1基因,并将其克隆到pMD 18-T载体上,进行序列分析.结果显示,这2株禽流感病毒NS1基因核苷酸序列的同源性为70.2%,分别属于NS等位基因群A和等位基因群B.再将克隆的NS1基因插入到pET-28a质粒中构建原核表达载体,将其转化到DH5α大肠埃希氏菌感受态细胞中,经双酶切鉴定及序列分析,表明获得了重组质粒pET-52NS1和pET-174NS1.经SDS-PAGE分析,重组质粒转化BL21(DE3)(pLysS)感受态细胞后,经IPTG诱导,获得了分子质量约为30 ku的NS1融合蛋白.用AIV多克隆血清做Western-blotting分析,发现来自2个等位基因群的NS1蛋白都具有较好的抗原活性.
    이용RT-PCR확증료2주H5N1아형금류감병독NS1기인,병장기극륭도pMD 18-T재체상,진행서렬분석.결과현시,저2주금류감병독NS1기인핵감산서렬적동원성위70.2%,분별속우NS등위기인군A화등위기인군B.재장극륭적NS1기인삽입도pET-28a질립중구건원핵표체재체,장기전화도DH5α대장애희씨균감수태세포중,경쌍매절감정급서렬분석,표명획득료중조질립pET-52NS1화pET-174NS1.경SDS-PAGE분석,중조질립전화BL21(DE3)(pLysS)감수태세포후,경IPTG유도,획득료분자질량약위30 ku적NS1융합단백.용AIV다극륭혈청주Western-blotting분석,발현래자2개등위기인군적NS1단백도구유교호적항원활성.
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