CAJ | 학술논문

目的:观察复合基因重组人骨形成蛋白2异种骨的成骨活性及其量效关系.方法:实验于2001-07/2002-05在安徽医科大学完成.以基因重组人骨形成蛋白-2与去抗原部分脱钙牛松质骨载体复合,制成复合基因重组人骨形成蛋白2的异种骨(基因重组人骨形成蛋白2/脱钙牛松质骨)植入小鼠右股部肌袋内.将6周龄雄性BALB/C小鼠144只,随机分成4组,植入含0.4 mg基因重组人骨形成蛋白2/脱钙牛松质骨骨粒组;植入含0.1 mg基因重组人骨形成蛋白-2/脱钙牛松质骨骨粒组,单纯植入脱钙牛松质骨载体骨粒组,单纯植入基因重组人骨形成蛋白2组,每组36只.术后7,14,21 d取材,通过大体观察、X射线影像学、组织学和骨计量学方法检测各组的诱导成骨活性.结果:144只实验动物在实验过程中无死亡,全部进入结果分析.①单纯植入基因重组人骨形成蛋白2组于光镜下见大量间充质细胞增殖,局部软骨组织生成,软骨细胞成熟.②脱钙牛松质骨与基因重组人骨形成蛋白2复合后,小牛骨松质结合基因重组人骨形成蛋白2呈实体性疏松绒毛结构,骨松质孔洞内填充云絮状基因重组人骨形成蛋白2物质,两者结合良好.③各组术后不同时间组织学检查结果为:植入含0.4 mg基因重组人骨形成蛋白2/脱钙牛松质骨骨粒组术后7 d出现软骨分化的小鼠有5只,苏木精-伊红染色观察,标本大量间充质细胞被诱导分化为软骨细胞,14 d有4只出现新骨诱导的现象,出现多处分散的骨软骨组织,多发生于植骨周围,21 d见散在软骨岛和稀疏退变小软骨岛,部分小鼠有新骨形成,但无骨髓及板层骨形成.植入含0.1 mg基因重组人骨形成蛋白2/脱钙牛松质骨骨粒组术后7 d出现软骨分化的小鼠有3只,见少量间充质细胞被诱导分化为软骨细胞,有零星的间充质细胞分化、过渡为软骨细胞;14 d有部分标本可见骨及软骨组织,有的可见稀疏小软骨岛存在,21 d有4只出现新骨诱导.单纯植入脱钙牛松质骨载体骨粒组主要表现为纤维结缔组织包绕植骨,植骨周围见组织细胞增生.单纯植入基因重组人骨形成蛋白2组以肌纤维为主,无典型软骨细胞出现.表现为正常横纹肌切面和肌间隔结构.④术后不同时间植入含0.4 mg基因重组人骨形成蛋白2/脱钙牛松质骨骨粒组和植入含0.1 mg基因重组人骨形成蛋白2/脱钙牛松质骨骨粒组的碱性磷酸酶活性和钙含量均高于对照组,前者高于后者,具有统计学意义(P＜0.05).结论:①基因重组人骨形成蛋白2/脱钙牛松质骨是高效诱导成骨材料,经处理的小牛松质骨是良好的缓释载体,提高了基因重组人骨形成蛋白2的骨诱导能力.②复合基因重组人骨形成蛋白2异种骨的成骨活性与基因重组人骨形成蛋白2的含量成正比. 目的:觀察複閤基因重組人骨形成蛋白2異種骨的成骨活性及其量效關繫.方法:實驗于2001-07/2002-05在安徽醫科大學完成.以基因重組人骨形成蛋白-2與去抗原部分脫鈣牛鬆質骨載體複閤,製成複閤基因重組人骨形成蛋白2的異種骨(基因重組人骨形成蛋白2/脫鈣牛鬆質骨)植入小鼠右股部肌袋內.將6週齡雄性BALB/C小鼠144隻,隨機分成4組,植入含0.4 mg基因重組人骨形成蛋白2/脫鈣牛鬆質骨骨粒組;植入含0.1 mg基因重組人骨形成蛋白-2/脫鈣牛鬆質骨骨粒組,單純植入脫鈣牛鬆質骨載體骨粒組,單純植入基因重組人骨形成蛋白2組,每組36隻.術後7,14,21 d取材,通過大體觀察、X射線影像學、組織學和骨計量學方法檢測各組的誘導成骨活性.結果:144隻實驗動物在實驗過程中無死亡,全部進入結果分析.①單純植入基因重組人骨形成蛋白2組于光鏡下見大量間充質細胞增殖,跼部軟骨組織生成,軟骨細胞成熟.②脫鈣牛鬆質骨與基因重組人骨形成蛋白2複閤後,小牛骨鬆質結閤基因重組人骨形成蛋白2呈實體性疏鬆絨毛結構,骨鬆質孔洞內填充雲絮狀基因重組人骨形成蛋白2物質,兩者結閤良好.③各組術後不同時間組織學檢查結果為:植入含0.4 mg基因重組人骨形成蛋白2/脫鈣牛鬆質骨骨粒組術後7 d齣現軟骨分化的小鼠有5隻,囌木精-伊紅染色觀察,標本大量間充質細胞被誘導分化為軟骨細胞,14 d有4隻齣現新骨誘導的現象,齣現多處分散的骨軟骨組織,多髮生于植骨週圍,21 d見散在軟骨島和稀疏退變小軟骨島,部分小鼠有新骨形成,但無骨髓及闆層骨形成.植入含0.1 mg基因重組人骨形成蛋白2/脫鈣牛鬆質骨骨粒組術後7 d齣現軟骨分化的小鼠有3隻,見少量間充質細胞被誘導分化為軟骨細胞,有零星的間充質細胞分化、過渡為軟骨細胞;14 d有部分標本可見骨及軟骨組織,有的可見稀疏小軟骨島存在,21 d有4隻齣現新骨誘導.單純植入脫鈣牛鬆質骨載體骨粒組主要錶現為纖維結締組織包繞植骨,植骨週圍見組織細胞增生.單純植入基因重組人骨形成蛋白2組以肌纖維為主,無典型軟骨細胞齣現.錶現為正常橫紋肌切麵和肌間隔結構.④術後不同時間植入含0.4 mg基因重組人骨形成蛋白2/脫鈣牛鬆質骨骨粒組和植入含0.1 mg基因重組人骨形成蛋白2/脫鈣牛鬆質骨骨粒組的堿性燐痠酶活性和鈣含量均高于對照組,前者高于後者,具有統計學意義(P＜0.05).結論:①基因重組人骨形成蛋白2/脫鈣牛鬆質骨是高效誘導成骨材料,經處理的小牛鬆質骨是良好的緩釋載體,提高瞭基因重組人骨形成蛋白2的骨誘導能力.②複閤基因重組人骨形成蛋白2異種骨的成骨活性與基因重組人骨形成蛋白2的含量成正比.
목적:관찰복합기인중조인골형성단백2이충골적성골활성급기량효관계.방법:실험우2001-07/2002-05재안휘의과대학완성.이기인중조인골형성단백-2여거항원부분탈개우송질골재체복합,제성복합기인중조인골형성단백2적이충골(기인중조인골형성단백2/탈개우송질골)식입소서우고부기대내.장6주령웅성BALB/C소서144지,수궤분성4조,식입함0.4 mg기인중조인골형성단백2/탈개우송질골골립조;식입함0.1 mg기인중조인골형성단백-2/탈개우송질골골립조,단순식입탈개우송질골재체골립조,단순식입기인중조인골형성단백2조,매조36지.술후7,14,21 d취재,통과대체관찰、X사선영상학、조직학화골계량학방법검측각조적유도성골활성.결과:144지실험동물재실험과정중무사망,전부진입결과분석.①단순식입기인중조인골형성단백2조우광경하견대량간충질세포증식,국부연골조직생성,연골세포성숙.②탈개우송질골여기인중조인골형성단백2복합후,소우골송질결합기인중조인골형성단백2정실체성소송융모결구,골송질공동내전충운서상기인중조인골형성단백2물질,량자결합량호.③각조술후불동시간조직학검사결과위:식입함0.4 mg기인중조인골형성단백2/탈개우송질골골립조술후7 d출현연골분화적소서유5지,소목정-이홍염색관찰,표본대량간충질세포피유도분화위연골세포,14 d유4지출현신골유도적현상,출현다처분산적골연골조직,다발생우식골주위,21 d견산재연골도화희소퇴변소연골도,부분소서유신골형성,단무골수급판층골형성.식입함0.1 mg기인중조인골형성단백2/탈개우송질골골립조술후7 d출현연골분화적소서유3지,견소량간충질세포피유도분화위연골세포,유령성적간충질세포분화、과도위연골세포;14 d유부분표본가견골급연골조직,유적가견희소소연골도존재,21 d유4지출현신골유도.단순식입탈개우송질골재체골립조주요표현위섬유결체조직포요식골,식골주위견조직세포증생.단순식입기인중조인골형성단백2조이기섬유위주,무전형연골세포출현.표현위정상횡문기절면화기간격결구.④술후불동시간식입함0.4 mg기인중조인골형성단백2/탈개우송질골골립조화식입함0.1 mg기인중조인골형성단백2/탈개우송질골골립조적감성린산매활성화개함량균고우대조조,전자고우후자,구유통계학의의(P＜0.05).결론:①기인중조인골형성단백2/탈개우송질골시고효유도성골재료,경처리적소우송질골시량호적완석재체,제고료기인중조인골형성단백2적골유도능력.②복합기인중조인골형성단백2이충골적성골활성여기인중조인골형성단백2적함량성정비.