麦类作物学报
麥類作物學報
맥류작물학보
JOURNAL OF TRITICEAE CROPS
2007年
3期
386-391
,共6页
刘阳娜%陈明%李连城%张晓科%徐兆师%马有志
劉暘娜%陳明%李連城%張曉科%徐兆師%馬有誌
류양나%진명%리련성%장효과%서조사%마유지
核蛋白%核定位信号%酵母筛选系统
覈蛋白%覈定位信號%酵母篩選繫統
핵단백%핵정위신호%효모사선계통
为了研究植物核蛋白的组成及其在各种环境条件下的动态变化,利用核蛋白的核定位信号(nuclear localization signals,NLS)筛选编码核蛋白的基因,建立了一套快速、省力、低成本的核蛋白筛选系统(nuclear transportation trap,NTT).通过鉴定发现,将合成的SV40蛋白大T抗原的核定位信号序列插入筛选载体的多克隆位点,转化酵母EGY48,插入核定位信号的筛选载体转化酵母后可以在选择性培养基(SD/His-/Leu-)上生长,而没有插入核定位信号的筛选载体转化酵母后不能在选择性培养基上生长,从而证明此核蛋白筛选系统有效.比较实验表明,本研究构建的核蛋白筛选系统与已报道的系统相比筛选效率更高.利用此系统从cDNA文库中分离编码核蛋白的基因,对于研究核蛋白的动态组成、了解核蛋白基因在调控细胞发育及其环境胁迫条件下的作用机制具有重要的意义.
為瞭研究植物覈蛋白的組成及其在各種環境條件下的動態變化,利用覈蛋白的覈定位信號(nuclear localization signals,NLS)篩選編碼覈蛋白的基因,建立瞭一套快速、省力、低成本的覈蛋白篩選繫統(nuclear transportation trap,NTT).通過鑒定髮現,將閤成的SV40蛋白大T抗原的覈定位信號序列插入篩選載體的多剋隆位點,轉化酵母EGY48,插入覈定位信號的篩選載體轉化酵母後可以在選擇性培養基(SD/His-/Leu-)上生長,而沒有插入覈定位信號的篩選載體轉化酵母後不能在選擇性培養基上生長,從而證明此覈蛋白篩選繫統有效.比較實驗錶明,本研究構建的覈蛋白篩選繫統與已報道的繫統相比篩選效率更高.利用此繫統從cDNA文庫中分離編碼覈蛋白的基因,對于研究覈蛋白的動態組成、瞭解覈蛋白基因在調控細胞髮育及其環境脅迫條件下的作用機製具有重要的意義.
위료연구식물핵단백적조성급기재각충배경조건하적동태변화,이용핵단백적핵정위신호(nuclear localization signals,NLS)사선편마핵단백적기인,건립료일투쾌속、성력、저성본적핵단백사선계통(nuclear transportation trap,NTT).통과감정발현,장합성적SV40단백대T항원적핵정위신호서렬삽입사선재체적다극륭위점,전화효모EGY48,삽입핵정위신호적사선재체전화효모후가이재선택성배양기(SD/His-/Leu-)상생장,이몰유삽입핵정위신호적사선재체전화효모후불능재선택성배양기상생장,종이증명차핵단백사선계통유효.비교실험표명,본연구구건적핵단백사선계통여이보도적계통상비사선효솔경고.이용차계통종cDNA문고중분리편마핵단백적기인,대우연구핵단백적동태조성、료해핵단백기인재조공세포발육급기배경협박조건하적작용궤제구유중요적의의.
