上海交通大学学报（医学版）
上海交通大學學報（醫學版）
상해교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2007年
10期
1185-1188,1222
,共5页
夏万尧%丁文龙%刘伟%钟梅芳%王丹茹%周广东%崔磊%曹谊林
夏萬堯%丁文龍%劉偉%鐘梅芳%王丹茹%週廣東%崔磊%曹誼林
하만요%정문룡%류위%종매방%왕단여%주엄동%최뢰%조의림
骨髓间充质干细胞%基因转染%腺病毒%人转化生长因子β1
骨髓間充質榦細胞%基因轉染%腺病毒%人轉化生長因子β1
골수간충질간세포%기인전염%선병독%인전화생장인자β1
目的 探讨携带人转化生长因子β1(hTGF-β1)的腺病毒载体(adeno-hTGF-β1)转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)及其表达的可行性.方法 重组adeno-hTGF-β1经293细胞包装、扩增后,转染猪BMSCs.转染后72 h,RT-PCR检测BMSCs的hTGF-β1mRNA表达;免疫细胞化学染色定性和酶联免疫吸附定量测定(ELISA法)hTGF-β1蛋白表达;MTT法测定水貂肺上皮细胞(MV-1-Lu)的生长抑制率,以验证转染后所表达的hTGF-β1蛋白的生物学活性.结果 转染后72 h,BMSCs能有效表达hTGF-β1mRNA,胞浆内有大量棕黄色的hTGF-β1蛋白表达,其蛋白表达量是转染adeno-lacZ的2.65倍(P＜0.05);MTT法检测结果显示,转染adeno-hTGF-β1的BMSCs所分泌的hTGF-β1蛋白对MV-1-Lu细胞的生长有显著抑制作用.结论 重组adeno-hTGF-β1能够被导入BMSCs,并表达有生物学活性的hTGF-β1蛋白.为hTGF-β1基因转染的BMSCs在软骨组织工程中的应用奠定了基础.
目的 探討攜帶人轉化生長因子β1(hTGF-β1)的腺病毒載體(adeno-hTGF-β1)轉染骨髓間充質榦細胞(BMSCs)及其錶達的可行性.方法 重組adeno-hTGF-β1經293細胞包裝、擴增後,轉染豬BMSCs.轉染後72 h,RT-PCR檢測BMSCs的hTGF-β1mRNA錶達;免疫細胞化學染色定性和酶聯免疫吸附定量測定(ELISA法)hTGF-β1蛋白錶達;MTT法測定水貂肺上皮細胞(MV-1-Lu)的生長抑製率,以驗證轉染後所錶達的hTGF-β1蛋白的生物學活性.結果 轉染後72 h,BMSCs能有效錶達hTGF-β1mRNA,胞漿內有大量棕黃色的hTGF-β1蛋白錶達,其蛋白錶達量是轉染adeno-lacZ的2.65倍(P＜0.05);MTT法檢測結果顯示,轉染adeno-hTGF-β1的BMSCs所分泌的hTGF-β1蛋白對MV-1-Lu細胞的生長有顯著抑製作用.結論 重組adeno-hTGF-β1能夠被導入BMSCs,併錶達有生物學活性的hTGF-β1蛋白.為hTGF-β1基因轉染的BMSCs在軟骨組織工程中的應用奠定瞭基礎.
목적 탐토휴대인전화생장인자β1(hTGF-β1)적선병독재체(adeno-hTGF-β1)전염골수간충질간세포(BMSCs)급기표체적가행성.방법 중조adeno-hTGF-β1경293세포포장、확증후,전염저BMSCs.전염후72 h,RT-PCR검측BMSCs적hTGF-β1mRNA표체;면역세포화학염색정성화매련면역흡부정량측정(ELISA법)hTGF-β1단백표체;MTT법측정수초폐상피세포(MV-1-Lu)적생장억제솔,이험증전염후소표체적hTGF-β1단백적생물학활성.결과 전염후72 h,BMSCs능유효표체hTGF-β1mRNA,포장내유대량종황색적hTGF-β1단백표체,기단백표체량시전염adeno-lacZ적2.65배(P＜0.05);MTT법검측결과현시,전염adeno-hTGF-β1적BMSCs소분비적hTGF-β1단백대MV-1-Lu세포적생장유현저억제작용.결론 중조adeno-hTGF-β1능구피도입BMSCs,병표체유생물학활성적hTGF-β1단백.위hTGF-β1기인전염적BMSCs재연골조직공정중적응용전정료기출.
