中国医学科学院学报
中國醫學科學院學報
중국의학과학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SINICAE
2009年
4期
468-472,后插4-后插5
,共6页
朱宛宛%李宁%王芳%付琳琳%徐艳玲%关云谦%张愚
硃宛宛%李寧%王芳%付琳琳%徐豔玲%關雲謙%張愚
주완완%리저%왕방%부림림%서염령%관운겸%장우
人胚胎干细胞%滋养层%包皮成纤维细胞%骨髓间充质干细胞
人胚胎榦細胞%滋養層%包皮成纖維細胞%骨髓間充質榦細胞
인배태간세포%자양층%포피성섬유세포%골수간충질간세포
目的 比较不同滋养层对保持连续传代培养的人胚胎干细胞(hESC)不分化和高增殖能力作用的差异.方法 分别用小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)、人包皮成纤维细胞(hFF)、人骨髓间充质细胞(hMSC)作为滋养层培养hESC系H9细胞,采用碱性磷酸酶染色和台盼蓝染色观察不同滋养层支持的hESC的碱性磷酸酶阳性克隆数、细胞产量和细胞存活率,并采用免疫荧光染色对传代5代以后的hESC进行生物学鉴定.结果 3种滋养层细胞均可维持hESC呈克隆样生长,但是不同滋养层支持的克隆的形态差异大.3种滋养层细胞支持的hESC的大鼠抗阶段特异性胚胎抗原-3及碱性磷酸酶染色均呈阳性.MEF支持的hESC的碱性磷酸酶阳性克隆数、细胞产量和细胞存活率均显著高于人来源滋养层(均P<0.01).hMSC支持的hESC的碱性磷酸酶阳性克隆数、细胞产量均显著高于hFF的hESC(均P<0.01).结论 3种滋养层细胞均可支持hESC的正常生长.MEF最有利于hESC的增殖,但是两种人来源滋养层细胞为去除动物源性的hESC培养体系奠定了基础.在维持hESC增殖方面,hMSC优于hFF.
目的 比較不同滋養層對保持連續傳代培養的人胚胎榦細胞(hESC)不分化和高增殖能力作用的差異.方法 分彆用小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)、人包皮成纖維細胞(hFF)、人骨髓間充質細胞(hMSC)作為滋養層培養hESC繫H9細胞,採用堿性燐痠酶染色和檯盼藍染色觀察不同滋養層支持的hESC的堿性燐痠酶暘性剋隆數、細胞產量和細胞存活率,併採用免疫熒光染色對傳代5代以後的hESC進行生物學鑒定.結果 3種滋養層細胞均可維持hESC呈剋隆樣生長,但是不同滋養層支持的剋隆的形態差異大.3種滋養層細胞支持的hESC的大鼠抗階段特異性胚胎抗原-3及堿性燐痠酶染色均呈暘性.MEF支持的hESC的堿性燐痠酶暘性剋隆數、細胞產量和細胞存活率均顯著高于人來源滋養層(均P<0.01).hMSC支持的hESC的堿性燐痠酶暘性剋隆數、細胞產量均顯著高于hFF的hESC(均P<0.01).結論 3種滋養層細胞均可支持hESC的正常生長.MEF最有利于hESC的增殖,但是兩種人來源滋養層細胞為去除動物源性的hESC培養體繫奠定瞭基礎.在維持hESC增殖方麵,hMSC優于hFF.
목적 비교불동자양층대보지련속전대배양적인배태간세포(hESC)불분화화고증식능력작용적차이.방법 분별용소서배태성섬유세포(MEF)、인포피성섬유세포(hFF)、인골수간충질세포(hMSC)작위자양층배양hESC계H9세포,채용감성린산매염색화태반람염색관찰불동자양층지지적hESC적감성린산매양성극륭수、세포산량화세포존활솔,병채용면역형광염색대전대5대이후적hESC진행생물학감정.결과 3충자양층세포균가유지hESC정극륭양생장,단시불동자양층지지적극륭적형태차이대.3충자양층세포지지적hESC적대서항계단특이성배태항원-3급감성린산매염색균정양성.MEF지지적hESC적감성린산매양성극륭수、세포산량화세포존활솔균현저고우인래원자양층(균P<0.01).hMSC지지적hESC적감성린산매양성극륭수、세포산량균현저고우hFF적hESC(균P<0.01).결론 3충자양층세포균가지지hESC적정상생장.MEF최유리우hESC적증식,단시량충인래원자양층세포위거제동물원성적hESC배양체계전정료기출.재유지hESC증식방면,hMSC우우hFF.
