CAJ | 학술논문

目的探讨敲低miR-221/222表达上调p27kip1对MCF-7人乳腺癌细胞系放射敏感性的影响.方法经生物信息学分析查询miR-221/222成熟体序列和它们与p27kip1的关系.脂质体共转染反义寡聚核苷酸(反义miR-221/222)后,用Northern blot法检测转染后MCF-7细胞miR-221、miR-222表达水平;将实验细胞分为6组:对照组、对照照射组、无义序列组、无义序列照射组、反义miR-221/222共转染组和反义miR-221/222共转染照射组.用MTT法检测细胞增殖及放射协同作用,流式细胞仪分析细胞周期,克隆形成实验检测细胞增殖,Western blot分析p27kip1蛋白的表达变化.数据间的方差分析采用F检验;两两比较采用LSD-t检验.结果经生物信息学分析显示miR-221/222成熟体序列的种子序列几乎一致,p27kip1是miR-221/222的靶基因.Northern blot显示反义miR-221/222共转染组miR-221、miR-222的表达水平明显下降(miR-221:P=0.000;miR-222:P=0.000).对照组及无义序列组之间miR-221、miR-222表达水平的差异无统计学意义(miR-221:P=0.371;miR-222:P=0.284).MTT结果显示转染后第4天共转染组肿瘤细胞生长抑制效果最好,细胞增殖率明显低于对照组和无义序列组(P=0.000),但与放射治疗无协同作用(P=0.091).流式细胞术检测可见共转染组细胞周期存在G0/G1期阻滞(P=0.000).经放射治疗后,可明显降低S期比例(P=0.002).克隆形成实验表明反义miR-221/222可增加MCF-7细胞的放射敏感性.Western blot显示反义miR-221/222共转染组的p27kip1蛋白表达明显上调(P=0.000).结论反义miR-221/222通过上调p27kip1蛋白表达可以增加MCF-7人乳腺癌细胞系放射敏感性.
목적 탐토고저miR-221/222표체상조p27kip1대MCF-7인유선암세포계방사민감성적영향.방법 경생물신식학분석사순miR-221/222성숙체서렬화타문여p27kip1적관계.지질체공전염반의과취핵감산(반의miR-221/222)후,용Northern blot법검측전염후MCF-7세포miR-221、miR-222표체수평;장실험세포분위6조:대조조、대조조사조、무의서렬조、무의서렬조사조、반의miR-221/222공전염조화반의miR-221/222공전염조사조.용MTT법검측세포증식급방사협동작용,류식세포의분석세포주기,극륭형성실험검측세포증식,Western blot분석p27kip1단백적표체변화.수거간적방차분석채용F검험;량량비교채용LSD-t검험.결과 경생물신식학분석현시miR-221/222성숙체서렬적충자서렬궤호일치,p27kip1시miR-221/222적파기인.Northern blot현시반의miR-221/222공전염조miR-221、miR-222적표체수평명현하강(miR-221:P=0.000;miR-222:P=0.000).대조조급무의서렬조지간miR-221、miR-222표체수평적차이무통계학의의(miR-221:P=0.371;miR-222:P=0.284).MTT결과현시전염후제4천공전염조종류세포생장억제효과최호,세포증식솔명현저우대조조화무의서렬조(P=0.000),단여방사치료무협동작용(P=0.091).류식세포술검측가견공전염조세포주기존재G0/G1기조체(P=0.000).경방사치료후,가명현강저S기비례(P=0.002).극륭형성실험표명반의miR-221/222가증가MCF-7세포적방사민감성.Western blot현시반의miR-221/222공전염조적p27kip1단백표체명현상조(P=0.000).결론 반의miR-221/222통과상조p27kip1단백표체가이증가MCF-7인유선암세포계방사민감성.