CAJ | 학술논문

目的:研究细胞介素18(IL-18)基因修饰对肺癌细胞来源exosome诱导杀伤肿瘤细胞作用的影响,以探讨高效exosome疫苗的制备.方法:提取IL-18基因修饰的NCI-H460细胞(IL-18/H460)、pcDNA3.1+载体修饰细胞(DNA3.1/H460)及未修饰NCI-H460细胞(NCI-H460)上清液的exosome,透射电镜下观察exosome形态;用Western blotting方法检测exosome中热休克蛋白70(HSP70)、人白细胞抗原(HLA)及IL-18的表达;用exosome直接刺激活化T细胞,用乳酸脱氢酶(LDH)法测定T细胞对NCI-H460细胞的杀伤作用;用exosome冲击树突状细胞(DCs),然后活化T细胞,测定对NCI-H460细胞的杀伤作用,计算杀伤率.结果:透射电镜下观察exosome具有典型的形态;3组exosome中均有HSP70及HLA蛋白表达,IL-18/H460组有IL-18蛋白表达.效靶比25:1、10:1、5:1时exosome直接提高活化T细胞的杀伤率,IL-18/H460组为(38.45±5.42)%、(25.17±3.94)%和(11.75±3.22)%,exosome冲击DCs活化T细胞的杀伤率,IL-18/H460组为(89.05±4.06)%、(64.97±6.02)%和(40.16±4.98)%,均高于其余2组.Exosome冲击DCs活化T细胞的杀伤作用强于exosome直接刺激活化的T细胞.结论:IL-18基因修饰能增强NCI-H460细胞来源exosome诱导的杀伤肿瘤细胞作用.
목적:연구세포개소18(IL-18)기인수식대폐암세포래원exosome유도살상종류세포작용적영향,이탐토고효exosome역묘적제비.방법:제취IL-18기인수식적NCI-H460세포(IL-18/H460)、pcDNA3.1+재체수식세포(DNA3.1/H460)급미수식NCI-H460세포(NCI-H460)상청액적exosome,투사전경하관찰exosome형태;용Western blotting방법검측exosome중열휴극단백70(HSP70)、인백세포항원(HLA)급IL-18적표체;용exosome직접자격활화T세포,용유산탈경매(LDH)법측정T세포대NCI-H460세포적살상작용;용exosome충격수돌상세포(DCs),연후활화T세포,측정대NCI-H460세포적살상작용,계산살상솔.결과:투사전경하관찰exosome구유전형적형태;3조exosome중균유HSP70급HLA단백표체,IL-18/H460조유IL-18단백표체.효파비25:1、10:1、5:1시exosome직접제고활화T세포적살상솔,IL-18/H460조위(38.45±5.42)%、(25.17±3.94)%화(11.75±3.22)%,exosome충격DCs활화T세포적살상솔,IL-18/H460조위(89.05±4.06)%、(64.97±6.02)%화(40.16±4.98)%,균고우기여2조.Exosome충격DCs활화T세포적살상작용강우exosome직접자격활화적T세포.결론:IL-18기인수식능증강NCI-H460세포래원exosome유도적살상종류세포작용.