微生物学杂志
微生物學雜誌
미생물학잡지
JOURNAL OF MICROBIOLOGY
2011年
5期
20-26
,共7页
宋成程%赵雪淞%杜秀丽%付玲%董帅%刘文爱%台桂花
宋成程%趙雪淞%杜秀麗%付玲%董帥%劉文愛%檯桂花
송성정%조설송%두수려%부령%동수%류문애%태계화
毁灭柱孢菌%人参皂苷Rb1%β-葡萄糖苷酶%分离纯化%酶学性质
燬滅柱孢菌%人參皂苷Rb1%β-葡萄糖苷酶%分離純化%酶學性質
훼멸주포균%인삼조감Rb1%β-포도당감매%분리순화%매학성질
通过DEAE-纤维素阴离子交换层析、30％ -80％ (NH4)2SO4盐析、Sepharose CL-6B凝胶过滤层析和Mono Q HR 5/5阴离子交换层析,从毁灭柱孢菌培养液中部分纯化出一种能够水解人参皂苷Rb1的β-葡萄糖苷酶F-I.F-I具有较好的pH稳定性和热稳定性,在pH4.0-11.0范围内和55℃以下表现出良好的β-葡萄糖苷酶活性,其最适pH为5.0,最适温度为55℃.EDTA、Cu2+和Zn2+对该酶活性有较强的抑制作用.底物专一性分析表明,F-I能高特异性水解人工合成的底物pNPG,还能水解β-葡萄糖苷键连接的二糖如纤维二糖和龙胆二糖,说明此酶为一种β-葡萄糖苷酶.F-I对人参皂苷Rb1表现了较强的水解活性,而对人参皂苷Rb2和Rc的水解活性较低.该酶水解人参皂苷Rb1的路径为Rb1→Rd→F2→C-K.F-I对人参皂苷Rb1的这种高效水解为稀有人参皂苷的工业制备奠定了基础.
通過DEAE-纖維素陰離子交換層析、30％ -80％ (NH4)2SO4鹽析、Sepharose CL-6B凝膠過濾層析和Mono Q HR 5/5陰離子交換層析,從燬滅柱孢菌培養液中部分純化齣一種能夠水解人參皂苷Rb1的β-葡萄糖苷酶F-I.F-I具有較好的pH穩定性和熱穩定性,在pH4.0-11.0範圍內和55℃以下錶現齣良好的β-葡萄糖苷酶活性,其最適pH為5.0,最適溫度為55℃.EDTA、Cu2+和Zn2+對該酶活性有較彊的抑製作用.底物專一性分析錶明,F-I能高特異性水解人工閤成的底物pNPG,還能水解β-葡萄糖苷鍵連接的二糖如纖維二糖和龍膽二糖,說明此酶為一種β-葡萄糖苷酶.F-I對人參皂苷Rb1錶現瞭較彊的水解活性,而對人參皂苷Rb2和Rc的水解活性較低.該酶水解人參皂苷Rb1的路徑為Rb1→Rd→F2→C-K.F-I對人參皂苷Rb1的這種高效水解為稀有人參皂苷的工業製備奠定瞭基礎.
통과DEAE-섬유소음리자교환층석、30％ -80％ (NH4)2SO4염석、Sepharose CL-6B응효과려층석화Mono Q HR 5/5음리자교환층석,종훼멸주포균배양액중부분순화출일충능구수해인삼조감Rb1적β-포도당감매F-I.F-I구유교호적pH은정성화열은정성,재pH4.0-11.0범위내화55℃이하표현출량호적β-포도당감매활성,기최괄pH위5.0,최괄온도위55℃.EDTA、Cu2+화Zn2+대해매활성유교강적억제작용.저물전일성분석표명,F-I능고특이성수해인공합성적저물pNPG,환능수해β-포도당감건련접적이당여섬유이당화룡담이당,설명차매위일충β-포도당감매.F-I대인삼조감Rb1표현료교강적수해활성,이대인삼조감Rb2화Rc적수해활성교저.해매수해인삼조감Rb1적로경위Rb1→Rd→F2→C-K.F-I대인삼조감Rb1적저충고효수해위희유인삼조감적공업제비전정료기출.
