上海交通大学学报
上海交通大學學報
상해교통대학학보
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY
2000年
4期
554-557
,共4页
果蝇醇脱氢酶%天冬氨酸-天冬酰胺脱氢酶突变体%热变性
果蠅醇脫氫酶%天鼕氨痠-天鼕酰胺脫氫酶突變體%熱變性
과승순탈경매%천동안산-천동선알탈경매돌변체%열변성
果蝇醇脱氢酶(ADH)依赖于NAD+.Asp38是一个保守残基,它与NAD+的AMP单位中核糖羟基相作用.野生型果蝇ADH的Asp38突变成Asn38(D38N)后,Km(app)NADP值下降至1/62,Kcat/Km(app)NADP值则增加至590倍(pH9.8).表明Asp38处于与NAD+结合区,而它的Asn38突变取代物使果蝇ADH既可用NAD+,又可用NADP+作为它的辅酶.热变性和pH-动力学参数实验证实,Asp38负电荷与NADP+上2′-磷酸基团间的斥力是NADP+不能作为野生型果蝇ADH辅酶的重要能障.
果蠅醇脫氫酶(ADH)依賴于NAD+.Asp38是一箇保守殘基,它與NAD+的AMP單位中覈糖羥基相作用.野生型果蠅ADH的Asp38突變成Asn38(D38N)後,Km(app)NADP值下降至1/62,Kcat/Km(app)NADP值則增加至590倍(pH9.8).錶明Asp38處于與NAD+結閤區,而它的Asn38突變取代物使果蠅ADH既可用NAD+,又可用NADP+作為它的輔酶.熱變性和pH-動力學參數實驗證實,Asp38負電荷與NADP+上2′-燐痠基糰間的斥力是NADP+不能作為野生型果蠅ADH輔酶的重要能障.
과승순탈경매(ADH)의뢰우NAD+.Asp38시일개보수잔기,타여NAD+적AMP단위중핵당간기상작용.야생형과승ADH적Asp38돌변성Asn38(D38N)후,Km(app)NADP치하강지1/62,Kcat/Km(app)NADP치칙증가지590배(pH9.8).표명Asp38처우여NAD+결합구,이타적Asn38돌변취대물사과승ADH기가용NAD+,우가용NADP+작위타적보매.열변성화pH-동역학삼수실험증실,Asp38부전하여NADP+상2′-린산기단간적척력시NADP+불능작위야생형과승ADH보매적중요능장.