中山大学学报（医学科学版）
中山大學學報（醫學科學版）
중산대학학보（의학과학판）
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2008年
2期
126-130
,共5页
纳宁%罗云%洪良庆%欧阳斌%黄正宇%缪斌%华学峰%杨培生%徐琳
納寧%囉雲%洪良慶%歐暘斌%黃正宇%繆斌%華學峰%楊培生%徐琳
납저%라운%홍량경%구양빈%황정우%무빈%화학봉%양배생%서림
不成熟树突状细胞%细胞因子%骨髓细胞
不成熟樹突狀細胞%細胞因子%骨髓細胞
불성숙수돌상세포%세포인자%골수세포
[目的]探索从小鼠骨髓细胞体外诱导大量优势不成熟 CD8a+DC(DC2)的新方法.[方法]取小鼠骨髓细胞,采用GM-CSF 5 ng/mL,IL-4 20 ng/mL,Flt3L 25 ng/mL,SCF 100 ng/mL 4种细胞因子组合,37℃,5%CO2体外培养诱导.第3、7、16天流式细胞术4色荧光标记法分析细胞表型,细胞计数分析总细胞产量,采用电镜、免疫荧光及相差摄影观察细胞形态.[结果]小鼠骨髓细胞经GM-CSF+IL-4+Flt3L+SCF诱导第3天在CD11c+的DC细胞群中可产生97.09%的CD8a+优势DC2细胞(占总细胞的34.6%),其中CD8a+MHCⅡ-的不成熟DC占61.77%;随培养时间延长比例下降,但培养第16天时CD8a+的不成熟DC仍占优势.总细胞计数分析显示随培养时间延长,细胞总数下降.电镜、免疫荧光及相差摄影等形态学检查显示所诱导的DC呈现典型树突状形态特征.[结论]GM-CSF+IL-4+Flt3L+SCF可以体外快速诱导小鼠骨髓细胞产生大量优势不成熟CD8a+DC.是体外制备不成熟DC2的一种较好的新方法.
[目的]探索從小鼠骨髓細胞體外誘導大量優勢不成熟 CD8a+DC(DC2)的新方法.[方法]取小鼠骨髓細胞,採用GM-CSF 5 ng/mL,IL-4 20 ng/mL,Flt3L 25 ng/mL,SCF 100 ng/mL 4種細胞因子組閤,37℃,5%CO2體外培養誘導.第3、7、16天流式細胞術4色熒光標記法分析細胞錶型,細胞計數分析總細胞產量,採用電鏡、免疫熒光及相差攝影觀察細胞形態.[結果]小鼠骨髓細胞經GM-CSF+IL-4+Flt3L+SCF誘導第3天在CD11c+的DC細胞群中可產生97.09%的CD8a+優勢DC2細胞(佔總細胞的34.6%),其中CD8a+MHCⅡ-的不成熟DC佔61.77%;隨培養時間延長比例下降,但培養第16天時CD8a+的不成熟DC仍佔優勢.總細胞計數分析顯示隨培養時間延長,細胞總數下降.電鏡、免疫熒光及相差攝影等形態學檢查顯示所誘導的DC呈現典型樹突狀形態特徵.[結論]GM-CSF+IL-4+Flt3L+SCF可以體外快速誘導小鼠骨髓細胞產生大量優勢不成熟CD8a+DC.是體外製備不成熟DC2的一種較好的新方法.
[목적]탐색종소서골수세포체외유도대량우세불성숙 CD8a+DC(DC2)적신방법.[방법]취소서골수세포,채용GM-CSF 5 ng/mL,IL-4 20 ng/mL,Flt3L 25 ng/mL,SCF 100 ng/mL 4충세포인자조합,37℃,5%CO2체외배양유도.제3、7、16천류식세포술4색형광표기법분석세포표형,세포계수분석총세포산량,채용전경、면역형광급상차섭영관찰세포형태.[결과]소서골수세포경GM-CSF+IL-4+Flt3L+SCF유도제3천재CD11c+적DC세포군중가산생97.09%적CD8a+우세DC2세포(점총세포적34.6%),기중CD8a+MHCⅡ-적불성숙DC점61.77%;수배양시간연장비례하강,단배양제16천시CD8a+적불성숙DC잉점우세.총세포계수분석현시수배양시간연장,세포총수하강.전경、면역형광급상차섭영등형태학검사현시소유도적DC정현전형수돌상형태특정.[결론]GM-CSF+IL-4+Flt3L+SCF가이체외쾌속유도소서골수세포산생대량우세불성숙CD8a+DC.시체외제비불성숙DC2적일충교호적신방법.
