河南农业科学
河南農業科學
하남농업과학
JOURNAL OF HENAN AGRICULTURAL SCIENCES
2009年
12期
121-123,127
,共4页
王丽%杨艳艳%张红%李清州%李学伍%张改平
王麗%楊豔豔%張紅%李清州%李學伍%張改平
왕려%양염염%장홍%리청주%리학오%장개평
猪瘟兔化弱毒%Erns基因%原核表达%纯化%猪瘟
豬瘟兔化弱毒%Erns基因%原覈錶達%純化%豬瘟
저온토화약독%Erns기인%원핵표체%순화%저온
将猪瘟兔化弱毒株Erns基因亚克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中,经PCR和双酶切鉴定以及序列分析,表明已成功构建了重组质粒.将重组质粒转化到大肠埃希氏菌BL21(DE3)中进行表达,经SDS-PAGE和Western-Blot检测,结果表明,融合表达蛋白的分子量约为55kD,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的45%.表达蛋白与兔抗CSFV多抗发生特异性反应,具有良好的反应原性.利用GST亲和层析柱对Erns融合蛋白进行了纯化.
將豬瘟兔化弱毒株Erns基因亞剋隆到原覈錶達載體pGEX-6p-1中,經PCR和雙酶切鑒定以及序列分析,錶明已成功構建瞭重組質粒.將重組質粒轉化到大腸埃希氏菌BL21(DE3)中進行錶達,經SDS-PAGE和Western-Blot檢測,結果錶明,融閤錶達蛋白的分子量約為55kD,目的蛋白錶達量佔菌體總蛋白的45%.錶達蛋白與兔抗CSFV多抗髮生特異性反應,具有良好的反應原性.利用GST親和層析柱對Erns融閤蛋白進行瞭純化.
장저온토화약독주Erns기인아극륭도원핵표체재체pGEX-6p-1중,경PCR화쌍매절감정이급서렬분석,표명이성공구건료중조질립.장중조질립전화도대장애희씨균BL21(DE3)중진행표체,경SDS-PAGE화Western-Blot검측,결과표명,융합표체단백적분자량약위55kD,목적단백표체량점균체총단백적45%.표체단백여토항CSFV다항발생특이성반응,구유량호적반응원성.이용GST친화층석주대Erns융합단백진행료순화.
