实验动物科学
實驗動物科學
실험동물과학
LABORATORY ANIMAL SCIENCE
2010年
1期
5-9,12
,共6页
马啸%叶华虎%杜小燕%王迎%陈振文
馬嘯%葉華虎%杜小燕%王迎%陳振文
마소%협화호%두소연%왕영%진진문
慢病毒%曲细精管%小鼠%转基因
慢病毒%麯細精管%小鼠%轉基因
만병독%곡세정관%소서%전기인
目的 探讨基于慢病毒载体曲细精管注射方法 建立转基因动物的可行性.方法 将8只4w~5w龄的雄性昆明小鼠分为高剂量(2只)、低剂量(6只)2个实验组,曲细精管注射滴度分别为1×109、2×107 TU/mL的绿色荧光蛋白慢病毒载体(LV-GFP),注射量均为20 μL/testis.注射后第4w、8w分别处死高剂量组小鼠各1只,于第5 w、13 w、17 w各处死2只低剂量组小鼠,取睾丸,通过PCR、荧光显微镜和免疫组化等方法 检测睾丸组织中GFP基因及表达.结果 3只低剂量和2只高剂量小鼠睾丸组织中均可检测到GFP基因;但GFP表达仅见于高剂量组小鼠睾丸,其分布范围主要集中于曲细精管基膜及管间隙.结论 慢病毒载体可通过曲细精管注射感染小鼠睾丸组织,但其感染效率与病毒滴度有关.
目的 探討基于慢病毒載體麯細精管註射方法 建立轉基因動物的可行性.方法 將8隻4w~5w齡的雄性昆明小鼠分為高劑量(2隻)、低劑量(6隻)2箇實驗組,麯細精管註射滴度分彆為1×109、2×107 TU/mL的綠色熒光蛋白慢病毒載體(LV-GFP),註射量均為20 μL/testis.註射後第4w、8w分彆處死高劑量組小鼠各1隻,于第5 w、13 w、17 w各處死2隻低劑量組小鼠,取睪汍,通過PCR、熒光顯微鏡和免疫組化等方法 檢測睪汍組織中GFP基因及錶達.結果 3隻低劑量和2隻高劑量小鼠睪汍組織中均可檢測到GFP基因;但GFP錶達僅見于高劑量組小鼠睪汍,其分佈範圍主要集中于麯細精管基膜及管間隙.結論 慢病毒載體可通過麯細精管註射感染小鼠睪汍組織,但其感染效率與病毒滴度有關.
목적 탐토기우만병독재체곡세정관주사방법 건립전기인동물적가행성.방법 장8지4w~5w령적웅성곤명소서분위고제량(2지)、저제량(6지)2개실험조,곡세정관주사적도분별위1×109、2×107 TU/mL적록색형광단백만병독재체(LV-GFP),주사량균위20 μL/testis.주사후제4w、8w분별처사고제량조소서각1지,우제5 w、13 w、17 w각처사2지저제량조소서,취고환,통과PCR、형광현미경화면역조화등방법 검측고환조직중GFP기인급표체.결과 3지저제량화2지고제량소서고환조직중균가검측도GFP기인;단GFP표체부견우고제량조소서고환,기분포범위주요집중우곡세정관기막급관간극.결론 만병독재체가통과곡세정관주사감염소서고환조직,단기감염효솔여병독적도유관.