目的 筛选对6'-羟基爵床定A(JR6)敏感的肿瘤细胞株并探讨其对细胞氧化还原功能的影响.方法 将人膀胱癌细胞株EJ、肝癌细胞Bel、肺癌细胞A549、结肠癌细胞HCT-8和HT-29、胃癌细胞BGC、大肠癌细胞LS180、宫颈癌细胞HeLa、肝癌细胞HepG2以及乳腺癌细胞MCF-7分为正常对照组、阳性药对照顺铂、多柔比星、替尼泊苷、依托泊苷和5-氟尿嘧啶组及JR6组,细胞加入相应的药物培养48 h后,采用噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞存活率并计算IC50值.选用对JR6与多柔比星作用敏感的人膀胱癌细胞EJ,加入相应的药物培养48 h后,分别检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量.EJ细胞分为外源性SOD+多柔比星9.19 μmol·L-1组和外源性SOD+JR6 3.02,9.07,27.2,81.7和245 μmol·L-1处理组,其中SOD分别为0,1.9,5.6,16.7,50和150 kU·L-1,MTF法检测细胞存活率.多柔比星9.19μmol·L-1,JR6 12.3,49.0和196 μmol·L-1加入EJ细胞,24 h后用激光共聚焦显微镜检测EJ细胞内活性氧类的含量.结果 EJ细胞对JR6较为敏感,IC50为57.1 μmol·L-1,多柔比星对EJ细胞的IC50为4.08 μmol·L-1.其余9种肿瘤细胞对JR6的IC50值为71.3～123 μmol·L-1.与正常对照组比较,多柔比星9.19μmol·L-1能明显降低EJ细胞内SOD,GSH-Px和CAT活性,分别降低了(64.3±2.1)%,(66.5±3.5)%和(49.6±1.9)%,而MDA的含量明显升高了(432.0±5.4)%(P<0.01);JR6 3.02,9.07,27.2,81.7和245 μmol·L-1使EJ细胞内SOD的活性分别降低了(7.28±0.3)%,(57.1±3.2)%,(66.5 4±4.7)%,(72.1±5.5)%和(77.8±2.4)%;GsH-Px活性分别降低了(20.34±1.6)%,(32.84±2.3)%,(45.3 4±3.6)%,(59.3±4.5)%和(71.9±4.2)%.CAT活性分别降低了(10.1±0.6)%,(15.9±0.7)%,(25.9±2.3)%,(38.8±3.5)%和(52.4±3.9)%;同时MI)A含量分别升高了(24.4±1.3)%,(90.2±8.70)%,(217.0 ±19.0)%,(356.0 ±24.0)%和(539.0±32.0)%(P<0.05,P<0.01).与无外源性SOD组比较,在外源性SOD存在时,多柔比星与JR6对EJ细胞的生长抑制率明显下降(P<0.005).与正常对照组相比,多柔比星9.19 μmol·L-1使EJ细胞活性氧类水平升高了(43.0±2.1)%,JR6 12.3,49.0和196 μmol·L-1使EJ细胞ROS水平分别升高了(40.7±0.7)%,(84.1±6.3)%和(151.0±2.9)%(P<0.01).结论 人膀胱癌细胞株EJ对JR6最敏感;JR6通过干预细胞内氧化还原系统平衡抑制细胞的增殖,外源性SOD可以拮抗JR6对敏感细胞增殖的抑制作用.
目的 篩選對6'-羥基爵床定A(JR6)敏感的腫瘤細胞株併探討其對細胞氧化還原功能的影響.方法 將人膀胱癌細胞株EJ、肝癌細胞Bel、肺癌細胞A549、結腸癌細胞HCT-8和HT-29、胃癌細胞BGC、大腸癌細胞LS180、宮頸癌細胞HeLa、肝癌細胞HepG2以及乳腺癌細胞MCF-7分為正常對照組、暘性藥對照順鉑、多柔比星、替尼泊苷、依託泊苷和5-氟尿嘧啶組及JR6組,細胞加入相應的藥物培養48 h後,採用噻唑藍比色法(MTT)檢測細胞存活率併計算IC50值.選用對JR6與多柔比星作用敏感的人膀胱癌細胞EJ,加入相應的藥物培養48 h後,分彆檢測細胞內超氧化物歧化酶(SOD)、穀胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和過氧化氫酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量.EJ細胞分為外源性SOD+多柔比星9.19 μmol·L-1組和外源性SOD+JR6 3.02,9.07,27.2,81.7和245 μmol·L-1處理組,其中SOD分彆為0,1.9,5.6,16.7,50和150 kU·L-1,MTF法檢測細胞存活率.多柔比星9.19μmol·L-1,JR6 12.3,49.0和196 μmol·L-1加入EJ細胞,24 h後用激光共聚焦顯微鏡檢測EJ細胞內活性氧類的含量.結果 EJ細胞對JR6較為敏感,IC50為57.1 μmol·L-1,多柔比星對EJ細胞的IC50為4.08 μmol·L-1.其餘9種腫瘤細胞對JR6的IC50值為71.3～123 μmol·L-1.與正常對照組比較,多柔比星9.19μmol·L-1能明顯降低EJ細胞內SOD,GSH-Px和CAT活性,分彆降低瞭(64.3±2.1)%,(66.5±3.5)%和(49.6±1.9)%,而MDA的含量明顯升高瞭(432.0±5.4)%(P<0.01);JR6 3.02,9.07,27.2,81.7和245 μmol·L-1使EJ細胞內SOD的活性分彆降低瞭(7.28±0.3)%,(57.1±3.2)%,(66.5 4±4.7)%,(72.1±5.5)%和(77.8±2.4)%;GsH-Px活性分彆降低瞭(20.34±1.6)%,(32.84±2.3)%,(45.3 4±3.6)%,(59.3±4.5)%和(71.9±4.2)%.CAT活性分彆降低瞭(10.1±0.6)%,(15.9±0.7)%,(25.9±2.3)%,(38.8±3.5)%和(52.4±3.9)%;同時MI)A含量分彆升高瞭(24.4±1.3)%,(90.2±8.70)%,(217.0 ±19.0)%,(356.0 ±24.0)%和(539.0±32.0)%(P<0.05,P<0.01).與無外源性SOD組比較,在外源性SOD存在時,多柔比星與JR6對EJ細胞的生長抑製率明顯下降(P<0.005).與正常對照組相比,多柔比星9.19 μmol·L-1使EJ細胞活性氧類水平升高瞭(43.0±2.1)%,JR6 12.3,49.0和196 μmol·L-1使EJ細胞ROS水平分彆升高瞭(40.7±0.7)%,(84.1±6.3)%和(151.0±2.9)%(P<0.01).結論 人膀胱癌細胞株EJ對JR6最敏感;JR6通過榦預細胞內氧化還原繫統平衡抑製細胞的增殖,外源性SOD可以拮抗JR6對敏感細胞增殖的抑製作用.
목적 사선대6'-간기작상정A(JR6)민감적종류세포주병탐토기대세포양화환원공능적영향.방법 장인방광암세포주EJ、간암세포Bel、폐암세포A549、결장암세포HCT-8화HT-29、위암세포BGC、대장암세포LS180、궁경암세포HeLa、간암세포HepG2이급유선암세포MCF-7분위정상대조조、양성약대조순박、다유비성、체니박감、의탁박감화5-불뇨밀정조급JR6조,세포가입상응적약물배양48 h후,채용새서람비색법(MTT)검측세포존활솔병계산IC50치.선용대JR6여다유비성작용민감적인방광암세포EJ,가입상응적약물배양48 h후,분별검측세포내초양화물기화매(SOD)、곡광감태과양화물매(GSH-Px)화과양화경매(CAT)활성급병이철(MDA)함량.EJ세포분위외원성SOD+다유비성9.19 μmol·L-1조화외원성SOD+JR6 3.02,9.07,27.2,81.7화245 μmol·L-1처리조,기중SOD분별위0,1.9,5.6,16.7,50화150 kU·L-1,MTF법검측세포존활솔.다유비성9.19μmol·L-1,JR6 12.3,49.0화196 μmol·L-1가입EJ세포,24 h후용격광공취초현미경검측EJ세포내활성양류적함량.결과 EJ세포대JR6교위민감,IC50위57.1 μmol·L-1,다유비성대EJ세포적IC50위4.08 μmol·L-1.기여9충종류세포대JR6적IC50치위71.3～123 μmol·L-1.여정상대조조비교,다유비성9.19μmol·L-1능명현강저EJ세포내SOD,GSH-Px화CAT활성,분별강저료(64.3±2.1)%,(66.5±3.5)%화(49.6±1.9)%,이MDA적함량명현승고료(432.0±5.4)%(P<0.01);JR6 3.02,9.07,27.2,81.7화245 μmol·L-1사EJ세포내SOD적활성분별강저료(7.28±0.3)%,(57.1±3.2)%,(66.5 4±4.7)%,(72.1±5.5)%화(77.8±2.4)%;GsH-Px활성분별강저료(20.34±1.6)%,(32.84±2.3)%,(45.3 4±3.6)%,(59.3±4.5)%화(71.9±4.2)%.CAT활성분별강저료(10.1±0.6)%,(15.9±0.7)%,(25.9±2.3)%,(38.8±3.5)%화(52.4±3.9)%;동시MI)A함량분별승고료(24.4±1.3)%,(90.2±8.70)%,(217.0 ±19.0)%,(356.0 ±24.0)%화(539.0±32.0)%(P<0.05,P<0.01).여무외원성SOD조비교,재외원성SOD존재시,다유비성여JR6대EJ세포적생장억제솔명현하강(P<0.005).여정상대조조상비,다유비성9.19 μmol·L-1사EJ세포활성양류수평승고료(43.0±2.1)%,JR6 12.3,49.0화196 μmol·L-1사EJ세포ROS수평분별승고료(40.7±0.7)%,(84.1±6.3)%화(151.0±2.9)%(P<0.01).결론 인방광암세포주EJ대JR6최민감;JR6통과간예세포내양화환원계통평형억제세포적증식,외원성SOD가이길항JR6대민감세포증식적억제작용.
