胃肠病学和肝病学杂志
胃腸病學和肝病學雜誌
위장병학화간병학잡지
CHINESE JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY AND HEPATOLOGY
2010年
8期
708-710
,共3页
陈培生%陈村龙%雷姗%毛正果%王继德%程天明
陳培生%陳村龍%雷姍%毛正果%王繼德%程天明
진배생%진촌룡%뢰산%모정과%왕계덕%정천명
Survivin启动子%pcDNA3.1/SurP/Trail%质粒构建%肝癌细胞%凋亡
Survivin啟動子%pcDNA3.1/SurP/Trail%質粒構建%肝癌細胞%凋亡
Survivin계동자%pcDNA3.1/SurP/Trail%질립구건%간암세포%조망
目的 了解Survivin启动子在HepG2肝癌细胞与3T3细胞中诱导Trail蛋白表达能力的差异,并评价其驱动Trail诱导肝癌细胞凋亡的能力.方法 以pGL3-surp340质粒为模板,扩增Survivin340启动子,构建重组质粒pcDNA3.1/SurP/Trail.将重组质粒分别转染HepG2肝癌细胞和3T3细胞,通过Western Blot检测两种细胞中Trail蛋白表达的差异.利用流式细胞术检测HepG2肝癌细胞及3T3细胞转染重组质粒pcDNA3.1/SurP/Trail后细胞凋亡的情况.结果 成功构建了重组质粒pcDNA3.1/SurP/Trail,转染HepG2和3T3两种细胞后,通过Western Blot检测,HepG2肝癌细胞Trail蛋白表达的相对灰度值为0.49±0.43,较3T3细胞Trail蛋白表达(0.15±0.37)明显增强(P<0.05).利用流式细胞术检测,HepG2肝癌细胞转染重组质粒组的凋亡率(%)为11.59±0.74,空白质粒组为3.45±0.52,未转染组为2.67±0.34;3T3细胞重组质粒组的凋亡率(%)为3.26±0.24,空白质粒组3.16±0.15,未转染组2.83±0.27.HepG2细胞转染重组质粒组凋亡率明显高于其他对照组(P<0.05).结论 含Survivin基因启动子的重组质粒pcDNA3.1/SurP/Trail在肿瘤细胞中能增强Trail蛋白的表达,并能诱导HepG2肝癌细胞凋亡.
目的 瞭解Survivin啟動子在HepG2肝癌細胞與3T3細胞中誘導Trail蛋白錶達能力的差異,併評價其驅動Trail誘導肝癌細胞凋亡的能力.方法 以pGL3-surp340質粒為模闆,擴增Survivin340啟動子,構建重組質粒pcDNA3.1/SurP/Trail.將重組質粒分彆轉染HepG2肝癌細胞和3T3細胞,通過Western Blot檢測兩種細胞中Trail蛋白錶達的差異.利用流式細胞術檢測HepG2肝癌細胞及3T3細胞轉染重組質粒pcDNA3.1/SurP/Trail後細胞凋亡的情況.結果 成功構建瞭重組質粒pcDNA3.1/SurP/Trail,轉染HepG2和3T3兩種細胞後,通過Western Blot檢測,HepG2肝癌細胞Trail蛋白錶達的相對灰度值為0.49±0.43,較3T3細胞Trail蛋白錶達(0.15±0.37)明顯增彊(P<0.05).利用流式細胞術檢測,HepG2肝癌細胞轉染重組質粒組的凋亡率(%)為11.59±0.74,空白質粒組為3.45±0.52,未轉染組為2.67±0.34;3T3細胞重組質粒組的凋亡率(%)為3.26±0.24,空白質粒組3.16±0.15,未轉染組2.83±0.27.HepG2細胞轉染重組質粒組凋亡率明顯高于其他對照組(P<0.05).結論 含Survivin基因啟動子的重組質粒pcDNA3.1/SurP/Trail在腫瘤細胞中能增彊Trail蛋白的錶達,併能誘導HepG2肝癌細胞凋亡.
목적 료해Survivin계동자재HepG2간암세포여3T3세포중유도Trail단백표체능력적차이,병평개기구동Trail유도간암세포조망적능력.방법 이pGL3-surp340질립위모판,확증Survivin340계동자,구건중조질립pcDNA3.1/SurP/Trail.장중조질립분별전염HepG2간암세포화3T3세포,통과Western Blot검측량충세포중Trail단백표체적차이.이용류식세포술검측HepG2간암세포급3T3세포전염중조질립pcDNA3.1/SurP/Trail후세포조망적정황.결과 성공구건료중조질립pcDNA3.1/SurP/Trail,전염HepG2화3T3량충세포후,통과Western Blot검측,HepG2간암세포Trail단백표체적상대회도치위0.49±0.43,교3T3세포Trail단백표체(0.15±0.37)명현증강(P<0.05).이용류식세포술검측,HepG2간암세포전염중조질립조적조망솔(%)위11.59±0.74,공백질립조위3.45±0.52,미전염조위2.67±0.34;3T3세포중조질립조적조망솔(%)위3.26±0.24,공백질립조3.16±0.15,미전염조2.83±0.27.HepG2세포전염중조질립조조망솔명현고우기타대조조(P<0.05).결론 함Survivin기인계동자적중조질립pcDNA3.1/SurP/Trail재종류세포중능증강Trail단백적표체,병능유도HepG2간암세포조망.
