解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2011年
4期
465-469
,共5页
陈雪%王雪松%李奕%陈颖%高银峰%王晓冬
陳雪%王雪鬆%李奕%陳穎%高銀峰%王曉鼕
진설%왕설송%리혁%진영%고은봉%왕효동
整合素-β1%层黏连蛋白%施万细胞%细胞外基质%免疫荧光%免疫印迹法%大鼠
整閤素-β1%層黏連蛋白%施萬細胞%細胞外基質%免疫熒光%免疫印跡法%大鼠
정합소-β1%층점련단백%시만세포%세포외기질%면역형광%면역인적법%대서
目的 探讨整合素-β1在层黏连蛋白(LN)促进施万细胞(SCs)合成细胞外基质(ECM)过程中的作用.方法 体外培养10只SD大鼠来源的SCs,经外源性LN 处理后,双重免疫荧光细胞化学法检测LN和整合素-β1的表达情况,免疫印迹法检测SCs内黏着斑激酶(FAK)的磷酸化水平.用抗体Ha2/5封闭细胞表面受体整合素-β1,再经外源性LN 处理后,免疫印迹法检测FAK的磷酸化水平变化,免疫荧光细胞化学法检测SCs合成LN、着位素、Ⅳ型胶原等ECM成分的变化.结果 经外源性LN处理后,SCs内LN和整合素-β1均有阳性免疫反应,且局部共表达,SCs内FAK的磷酸化水平增加.封闭细胞表面受体整合素-β1后,SCs内FAK的磷酸化水平明显下降,SCs内LN、着位素、IV型胶原等ECM成分的表达和分布未见明显改变.结论 LN能与SCs表面受体整合素-β1相结合,激发细胞内整合素-β1依赖的FAK磷酸化途径,但LN促进SCs合成ECM的作用并不依赖于整合素-β1介导的信号途径.
目的 探討整閤素-β1在層黏連蛋白(LN)促進施萬細胞(SCs)閤成細胞外基質(ECM)過程中的作用.方法 體外培養10隻SD大鼠來源的SCs,經外源性LN 處理後,雙重免疫熒光細胞化學法檢測LN和整閤素-β1的錶達情況,免疫印跡法檢測SCs內黏著斑激酶(FAK)的燐痠化水平.用抗體Ha2/5封閉細胞錶麵受體整閤素-β1,再經外源性LN 處理後,免疫印跡法檢測FAK的燐痠化水平變化,免疫熒光細胞化學法檢測SCs閤成LN、著位素、Ⅳ型膠原等ECM成分的變化.結果 經外源性LN處理後,SCs內LN和整閤素-β1均有暘性免疫反應,且跼部共錶達,SCs內FAK的燐痠化水平增加.封閉細胞錶麵受體整閤素-β1後,SCs內FAK的燐痠化水平明顯下降,SCs內LN、著位素、IV型膠原等ECM成分的錶達和分佈未見明顯改變.結論 LN能與SCs錶麵受體整閤素-β1相結閤,激髮細胞內整閤素-β1依賴的FAK燐痠化途徑,但LN促進SCs閤成ECM的作用併不依賴于整閤素-β1介導的信號途徑.
목적 탐토정합소-β1재층점련단백(LN)촉진시만세포(SCs)합성세포외기질(ECM)과정중적작용.방법 체외배양10지SD대서래원적SCs,경외원성LN 처리후,쌍중면역형광세포화학법검측LN화정합소-β1적표체정황,면역인적법검측SCs내점착반격매(FAK)적린산화수평.용항체Ha2/5봉폐세포표면수체정합소-β1,재경외원성LN 처리후,면역인적법검측FAK적린산화수평변화,면역형광세포화학법검측SCs합성LN、착위소、Ⅳ형효원등ECM성분적변화.결과 경외원성LN처리후,SCs내LN화정합소-β1균유양성면역반응,차국부공표체,SCs내FAK적린산화수평증가.봉폐세포표면수체정합소-β1후,SCs내FAK적린산화수평명현하강,SCs내LN、착위소、IV형효원등ECM성분적표체화분포미견명현개변.결론 LN능여SCs표면수체정합소-β1상결합,격발세포내정합소-β1의뢰적FAK린산화도경,단LN촉진SCs합성ECM적작용병불의뢰우정합소-β1개도적신호도경.