CAJ | 학술논문

目的：研究腺病毒载体左侧反向末端重复区(ITR)对下游基因表达特异性的影响。方法：采用分子生物学方法及Gateway技术构建正反2个方向含有人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子及GFP报告基因的重组腺病毒载体。以含CMV启动子及GFP报告基因的重组腺病毒载体和不含任何启动子只含GFP报告基因的重组腺病毒载体作对照。重组腺病毒质粒经Pac Ⅰ线性化后用脂质体转染法转染293A细胞，包装并扩增出重组腺病毒颗粒，TCID50测得滴度后分别以相同的感染复数感染4种肿瘤细胞，观察荧光表达情况。结果：携带正向和反向hTERT启动子的重组腺病毒载体在各细胞中荧光表达量无差异，无启动子的重组载体在腺病毒增殖比较强的细胞中有微弱荧光表达。结论：重组腺病毒左侧ITR能够影响上下游特异启动子及其调控基因表达，但对上下游基因的影响程度无明显差异，并且左侧ITR具有类启动子功能。
목적：연구선병독재체좌측반향말단중복구(ITR)대하유기인표체특이성적영향。방법：채용분자생물학방법급Gateway기술구건정반2개방향함유인단립매역전록매(hTERT)계동자급GFP보고기인적중조선병독재체。이함CMV계동자급GFP보고기인적중조선병독재체화불함임하계동자지함GFP보고기인적중조선병독재체작대조。중조선병독질립경Pac Ⅰ선성화후용지질체전염법전염293A세포，포장병확증출중조선병독과립，TCID50측득적도후분별이상동적감염복수감염4충종류세포，관찰형광표체정황。결과：휴대정향화반향hTERT계동자적중조선병독재체재각세포중형광표체량무차이，무계동자적중조재체재선병독증식비교강적세포중유미약형광표체。결론：중조선병독좌측ITR능구영향상하유특이계동자급기조공기인표체，단대상하유기인적영향정도무명현차이，병차좌측ITR구유류계동자공능。