大鼠Uqcrfs1重组质粒的构建及其在HEK293T细胞中的表达
대서Uqcrfs1중조질립적구건급기재HEK293T세포중적표체
Construction of Rat Uqcrfs1 for its Expression in HEK 293T Cell
  • 万方数据
    中国中西医结合肾病杂志 중국중서의결합신병잡지
    CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN NEPHROLOGY
    2012年 2期 103-106 ,共4页

    孙斯凡%古艳婷%李平%王红盼%董晞%杨靖%赵婷婷%王旭

    손사범%고염정%리평%왕홍반%동희%양정%조정정%왕욱

    Uqcrfs1%重组质粒%糖尿病肾病 Uqcrfs1%重組質粒%糖尿病腎病
    Uqcrfs1%중조질립%당뇨병신병
    目的:构建大鼠Uqcrfs1的重组质粒并检测其在人胚胎肾293T细胞中的表达.方法:应用RT-PCR方法从大鼠肾脏组织总RNA中扩增出编码Uqcrfs1的cDNA,克隆至pUM-T载体并测序,然后亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,酶切鉴定及测序正确后以磷酸钙共沉淀法瞬时转染HEK 293T细胞,使用RT-PCR、Western Blot方法检测重组质粒在转录及蛋白水平的表达.结果:测序结果证实PCR扩增得到编码Uqcrfs1的cDNA序列正确;磷酸钙共沉淀法转染HEK 293T细胞后,在基因转录与蛋白表达水平,结果达到预期.结论:成功构建大鼠Uqcrfs1的重组质粒,该重组质粒可在HEK 293T中过表达.
    목적:구건대서Uqcrfs1적중조질립병검측기재인배태신293T세포중적표체.방법:응용RT-PCR방법종대서신장조직총RNA중확증출편마Uqcrfs1적cDNA,극륭지pUM-T재체병측서,연후아극륭지진핵표체재체pcDNA3.1/V5-His,매절감정급측서정학후이린산개공침정법순시전염HEK 293T세포,사용RT-PCR、Western Blot방법검측중조질립재전록급단백수평적표체.결과:측서결과증실PCR확증득도편마Uqcrfs1적cDNA서렬정학;린산개공침정법전염HEK 293T세포후,재기인전록여단백표체수평,결과체도예기.결론:성공구건대서Uqcrfs1적중조질립,해중조질립가재HEK 293T중과표체.
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