西北植物学报
西北植物學報
서북식물학보
ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA
2012年
9期
1903-1909
,共7页
金德善%卢存福%兰小中%刘雪萍%乔佩%李红英%陈玉珍
金德善%盧存福%蘭小中%劉雪萍%喬珮%李紅英%陳玉珍
금덕선%로존복%란소중%류설평%교패%리홍영%진옥진
雪莲%双向电泳%样品制备%蛋白质组
雪蓮%雙嚮電泳%樣品製備%蛋白質組
설련%쌍향전영%양품제비%단백질조
以产自西藏绵头雪莲为材料,分别采用TCA/丙酮法、尿素法和酚法,提取雪莲愈伤组织蛋白质并进行双向电泳,对蛋白产量和纯度以及电泳图谱进行比较.结果表明:(1)酚法较TCA/丙酮法和尿素法获得的蛋白质更纯,杂质少,蛋白点多且分辨率较高,在二维电泳图谱中背景清晰,横纹和纵纹较少.(2)对酚法提取的蛋白质样品进行上样量的比较结果显示,17 cm胶条500 μg上样量二维图谱的背景和蛋白点分布较好.(3)用0℃处理雪莲愈伤组织12h,利用建立的双向电泳体系分析结果发现,有33个蛋白点比常温(23℃)上调1.5倍表达,有5个蛋白点的表达下调2倍.(4)质谱鉴定结果表明,低温诱导的蛋白包括NADP-依赖型异柠檬酸脱氢酶、腺苷高半胱氨酸酶、抗性RPP8类蛋白、蛋白点gi│13129470、α-微管蛋白,分别与新陈代谢、植物防御、能量代谢、细胞的结构蛋白相关.
以產自西藏綿頭雪蓮為材料,分彆採用TCA/丙酮法、尿素法和酚法,提取雪蓮愈傷組織蛋白質併進行雙嚮電泳,對蛋白產量和純度以及電泳圖譜進行比較.結果錶明:(1)酚法較TCA/丙酮法和尿素法穫得的蛋白質更純,雜質少,蛋白點多且分辨率較高,在二維電泳圖譜中揹景清晰,橫紋和縱紋較少.(2)對酚法提取的蛋白質樣品進行上樣量的比較結果顯示,17 cm膠條500 μg上樣量二維圖譜的揹景和蛋白點分佈較好.(3)用0℃處理雪蓮愈傷組織12h,利用建立的雙嚮電泳體繫分析結果髮現,有33箇蛋白點比常溫(23℃)上調1.5倍錶達,有5箇蛋白點的錶達下調2倍.(4)質譜鑒定結果錶明,低溫誘導的蛋白包括NADP-依賴型異檸檬痠脫氫酶、腺苷高半胱氨痠酶、抗性RPP8類蛋白、蛋白點gi│13129470、α-微管蛋白,分彆與新陳代謝、植物防禦、能量代謝、細胞的結構蛋白相關.
이산자서장면두설련위재료,분별채용TCA/병동법、뇨소법화분법,제취설련유상조직단백질병진행쌍향전영,대단백산량화순도이급전영도보진행비교.결과표명:(1)분법교TCA/병동법화뇨소법획득적단백질경순,잡질소,단백점다차분변솔교고,재이유전영도보중배경청석,횡문화종문교소.(2)대분법제취적단백질양품진행상양량적비교결과현시,17 cm효조500 μg상양량이유도보적배경화단백점분포교호.(3)용0℃처리설련유상조직12h,이용건립적쌍향전영체계분석결과발현,유33개단백점비상온(23℃)상조1.5배표체,유5개단백점적표체하조2배.(4)질보감정결과표명,저온유도적단백포괄NADP-의뢰형이저몽산탈경매、선감고반광안산매、항성RPP8류단백、단백점gi│13129470、α-미관단백,분별여신진대사、식물방어、능량대사、세포적결구단백상관.
