CAJ | 학술논문

背景与目的:在利用磷酸化蛋白质富集结合蛋白质组学技术分析EB病毒潜伏膜蛋白1(latent membrane protein 1,LMP1)调节的磷酸化蛋白质分子时,我们发现了包括Annexin Ⅰ在内的25个新的受EB病毒LMP1调节的磷酸化蛋白质分子.本实验探讨LMPl调节Annexin Ⅰ磷酸化的信号通路.方法:采用鼻咽癌细胞系CNE1和LMP1稳定表达的细胞系CNE1-LMP1,Western blot检测Annexi Ⅰ的蛋白表达水平;免疫沉淀结合Western blot检测Annexin Ⅰ的丝氨酸和酪氨酸磷酸化;激酶分析实验检测蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)的活性.结果:LMP1对Annexin Ⅰ的蛋白表达水平没有影响,LMP1上调Annexin Ⅰ的丝氨酸磷酸化水平,而对酪氨酸磷酸化水平没有影响.在CNE1细胞中PKC的相对活性为0.97±0.05,CNE1-LMP1细胞中的PKC相对活性为1.22±0.10,CNE1与CNE1-LMP1细胞之间PKC的活性差异有统计学意义(P＜0.01,n=6),表明LMP1可以上调PKC活性.Annexin Ⅰ的丝氨酸磷酸化水平随PKC活性的变化而变化.结论:EB病毒LMP1通过PKC信号通路调节Annexin Ⅰ丝氨酸磷酸化.
배경여목적:재이용린산화단백질부집결합단백질조학기술분석EB병독잠복막단백1(latent membrane protein 1,LMP1)조절적린산화단백질분자시,아문발현료포괄Annexin Ⅰ재내적25개신적수EB병독LMP1조절적린산화단백질분자.본실험탐토LMPl조절Annexin Ⅰ린산화적신호통로.방법:채용비인암세포계CNE1화LMP1은정표체적세포계CNE1-LMP1,Western blot검측Annexi Ⅰ적단백표체수평;면역침정결합Western blot검측Annexin Ⅰ적사안산화락안산린산화;격매분석실험검측단백격매C(protein kinase C,PKC)적활성.결과:LMP1대Annexin Ⅰ적단백표체수평몰유영향,LMP1상조Annexin Ⅰ적사안산린산화수평,이대락안산린산화수평몰유영향.재CNE1세포중PKC적상대활성위0.97±0.05,CNE1-LMP1세포중적PKC상대활성위1.22±0.10,CNE1여CNE1-LMP1세포지간PKC적활성차이유통계학의의(P＜0.01,n=6),표명LMP1가이상조PKC활성.Annexin Ⅰ적사안산린산화수평수PKC활성적변화이변화.결론:EB병독LMP1통과PKC신호통로조절Annexin Ⅰ사안산린산화.