中国兽医科学
中國獸醫科學
중국수의과학
VETERINARY SCIENCE IN CHINA
2006年
10期
811-814
,共4页
唐宇龙%刘湘新%杨华%丁元生%胡忠义
唐宇龍%劉湘新%楊華%丁元生%鬍忠義
당우룡%류상신%양화%정원생%호충의
结核分枝杆菌%融合蛋白CFP10-ESAT-6%表达%多克隆抗体
結覈分枝桿菌%融閤蛋白CFP10-ESAT-6%錶達%多剋隆抗體
결핵분지간균%융합단백CFP10-ESAT-6%표체%다극륭항체
以结核分枝杆菌标准株H37Rv的基因组DNA为模板,经重叠PCR扩增获得CFP10-ESAT-6融合基因片段,克隆于pET21a表达载体中,获得了重组质粒pET21a-CFP10-ESAT-6,将其转化大肠杆菌BL21细胞,经IPTG诱导表达,得到了25 ku的目的蛋白.表达产物经纯化和定量分析后免疫新西兰大白兔,收集兔血清进行抗体ELISA检测.结果显示,成功构建了CFP10-ESAT-6融合基因的原核表达质粒,获得了CFP10-ESAT-6融合蛋白,以此蛋白免疫动物可产生高效价的抗体.
以結覈分枝桿菌標準株H37Rv的基因組DNA為模闆,經重疊PCR擴增穫得CFP10-ESAT-6融閤基因片段,剋隆于pET21a錶達載體中,穫得瞭重組質粒pET21a-CFP10-ESAT-6,將其轉化大腸桿菌BL21細胞,經IPTG誘導錶達,得到瞭25 ku的目的蛋白.錶達產物經純化和定量分析後免疫新西蘭大白兔,收集兔血清進行抗體ELISA檢測.結果顯示,成功構建瞭CFP10-ESAT-6融閤基因的原覈錶達質粒,穫得瞭CFP10-ESAT-6融閤蛋白,以此蛋白免疫動物可產生高效價的抗體.
이결핵분지간균표준주H37Rv적기인조DNA위모판,경중첩PCR확증획득CFP10-ESAT-6융합기인편단,극륭우pET21a표체재체중,획득료중조질립pET21a-CFP10-ESAT-6,장기전화대장간균BL21세포,경IPTG유도표체,득도료25 ku적목적단백.표체산물경순화화정량분석후면역신서란대백토,수집토혈청진행항체ELISA검측.결과현시,성공구건료CFP10-ESAT-6융합기인적원핵표체질립,획득료CFP10-ESAT-6융합단백,이차단백면역동물가산생고효개적항체.
