CAJ | 학술논문

为寻求一种快速、有效的马泰勒虫(Theileria equi,T.equi) PCR检测方法.基于马泰勒虫18S rRNA基因序列,在其V4高变区设计特异性引物Te-18F、Te-18R,通过PCR技术获得了531 bp的核酸片段.用该引物对马泰勒虫、马泰勒虫和驽巴贝斯虫混合样本、驽巴贝斯虫、尤氏泰勒虫、中华泰勒虫、环形泰勒虫、绵羊泰勒虫、吕氏泰勒虫和瑟氏泰勒虫基因组模板进行特异性试验.同时对马泰勒虫基因组模板进行不同浓度稀释后扩增,以便于确定试验的敏感性.用本试验建立的方法与常规显微镜镜检方法对45份马属动物血样进行检测.特异性试验显示,在被检测的9个样本中,只有马泰勒虫及马泰勒虫和驽巴贝斯虫混合模板中扩增出了符合大小的特异核酸片段.驽巴贝斯虫、尤氏泰勒虫、中华泰勒虫、环形泰勒虫、绵羊泰勒虫、吕氏泰勒虫和瑟氏泰勒虫的扩增结果均为阴性.灵敏度试验结果表明,PCR对马泰勒虫的扩增效率可达到10-13.对本试验建立的PCR检测马泰勒虫方法评估结果显示,PCR对马泰勒虫的检出率为17.78％(8/45),显微镜镜检结果只有8.89％(4/45)两者的符合率为100％.本试验建立的马泰勒虫PCR检测方法不失,为一种好的检测方法.
위심구일충쾌속、유효적마태륵충(Theileria equi,T.equi) PCR검측방법.기우마태륵충18S rRNA기인서렬,재기V4고변구설계특이성인물Te-18F、Te-18R,통과PCR기술획득료531 bp적핵산편단.용해인물대마태륵충、마태륵충화노파패사충혼합양본、노파패사충、우씨태륵충、중화태륵충、배형태륵충、면양태륵충、려씨태륵충화슬씨태륵충기인조모판진행특이성시험.동시대마태륵충기인조모판진행불동농도희석후확증,이편우학정시험적민감성.용본시험건립적방법여상규현미경경검방법대45빈마속동물혈양진행검측.특이성시험현시,재피검측적9개양본중,지유마태륵충급마태륵충화노파패사충혼합모판중확증출료부합대소적특이핵산편단.노파패사충、우씨태륵충、중화태륵충、배형태륵충、면양태륵충、려씨태륵충화슬씨태륵충적확증결과균위음성.령민도시험결과표명,PCR대마태륵충적확증효솔가체도10-13.대본시험건립적PCR검측마태륵충방법평고결과현시,PCR대마태륵충적검출솔위17.78％(8/45),현미경경검결과지유8.89％(4/45)량자적부합솔위100％.본시험건립적마태륵충PCR검측방법불실,위일충호적검측방법.