实用儿科临床杂志
實用兒科臨床雜誌
실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2009年
23期
1806-1808
,共3页
吴晓娟%魏明发%柴成伟%高贺云%黎润光%冯杰雄%邓科
吳曉娟%魏明髮%柴成偉%高賀雲%黎潤光%馮傑雄%鄧科
오효연%위명발%시성위%고하운%려윤광%풍걸웅%산과
骨髓间充质干细胞%胶质细胞源神经营养因子%神经细胞%大鼠
骨髓間充質榦細胞%膠質細胞源神經營養因子%神經細胞%大鼠
골수간충질간세포%효질세포원신경영양인자%신경세포%대서
目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)神经分化及胶质细胞源神经营养因子(GDNF)表达的变化.方法 体外培养大鼠BMSCs,传至第4代,行神经诱导分化.流式细胞术检测培养细胞表面的骨髓基质细胞标志CD90和造血细胞标志CD45.以10μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和(或)10μg/L表皮生长因子(EGF)在含100 mL/L胎牛血清(FBS)的DMEM培养基中诱导,7 d后观察其细胞形态变化,免疫组织化学法检测其胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达,RT-PCR检测其GDNF及其受体BET mRNA的变化.结果 BMSCs能在体外成功培养及纯化,第4代细胞高表达CD90(93.4%),不表达CD45.诱导7 d后,实验组大鼠均可见GFAP及NSE表达,而对照组为阴性.实验组中bFGF组及bFGF加EGF组表达的NSE高于EGF组,而EGF组表达GFAP更高.RT-PCR检测示BMSCs向神经细胞诱导后,GDNF表达显著增强,并促使BET基因表达,以bFGF加EGF组最明显.结论 bFGF及EGF可促进大鼠BMSCs向神经细胞分化,在向神经细胞分化的过程中,能促进GDNF和BET基因的表达,GDNF可能在BMSCs向神经细胞分化过程中起重要作用.
目的 探討大鼠骨髓間充質榦細胞(BMSCs)神經分化及膠質細胞源神經營養因子(GDNF)錶達的變化.方法 體外培養大鼠BMSCs,傳至第4代,行神經誘導分化.流式細胞術檢測培養細胞錶麵的骨髓基質細胞標誌CD90和造血細胞標誌CD45.以10μg/L堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)和(或)10μg/L錶皮生長因子(EGF)在含100 mL/L胎牛血清(FBS)的DMEM培養基中誘導,7 d後觀察其細胞形態變化,免疫組織化學法檢測其膠質纖維痠性蛋白(GFAP)及神經元特異性烯醇化酶(NSE)的錶達,RT-PCR檢測其GDNF及其受體BET mRNA的變化.結果 BMSCs能在體外成功培養及純化,第4代細胞高錶達CD90(93.4%),不錶達CD45.誘導7 d後,實驗組大鼠均可見GFAP及NSE錶達,而對照組為陰性.實驗組中bFGF組及bFGF加EGF組錶達的NSE高于EGF組,而EGF組錶達GFAP更高.RT-PCR檢測示BMSCs嚮神經細胞誘導後,GDNF錶達顯著增彊,併促使BET基因錶達,以bFGF加EGF組最明顯.結論 bFGF及EGF可促進大鼠BMSCs嚮神經細胞分化,在嚮神經細胞分化的過程中,能促進GDNF和BET基因的錶達,GDNF可能在BMSCs嚮神經細胞分化過程中起重要作用.
목적 탐토대서골수간충질간세포(BMSCs)신경분화급효질세포원신경영양인자(GDNF)표체적변화.방법 체외배양대서BMSCs,전지제4대,행신경유도분화.류식세포술검측배양세포표면적골수기질세포표지CD90화조혈세포표지CD45.이10μg/L감성성섬유세포생장인자(bFGF)화(혹)10μg/L표피생장인자(EGF)재함100 mL/L태우혈청(FBS)적DMEM배양기중유도,7 d후관찰기세포형태변화,면역조직화학법검측기효질섬유산성단백(GFAP)급신경원특이성희순화매(NSE)적표체,RT-PCR검측기GDNF급기수체BET mRNA적변화.결과 BMSCs능재체외성공배양급순화,제4대세포고표체CD90(93.4%),불표체CD45.유도7 d후,실험조대서균가견GFAP급NSE표체,이대조조위음성.실험조중bFGF조급bFGF가EGF조표체적NSE고우EGF조,이EGF조표체GFAP경고.RT-PCR검측시BMSCs향신경세포유도후,GDNF표체현저증강,병촉사BET기인표체,이bFGF가EGF조최명현.결론 bFGF급EGF가촉진대서BMSCs향신경세포분화,재향신경세포분화적과정중,능촉진GDNF화BET기인적표체,GDNF가능재BMSCs향신경세포분화과정중기중요작용.
