陕西医学杂志
陝西醫學雜誌
협서의학잡지
SHAANXI MEDICAL JOURNAL
2004年
7期
579-581
,共3页
袁永辉%吴人亮%王曦%陈多恩
袁永輝%吳人亮%王晞%陳多恩
원영휘%오인량%왕희%진다은
细胞凋亡%原位缺口末端标记/诊断应用%方法
細胞凋亡%原位缺口末耑標記/診斷應用%方法
세포조망%원위결구말단표기/진단응용%방법
目的:寻找一种能快速、准确检测以石蜡切片、冰冻切片与细胞爬片或涂片等为实验材料的原位细胞凋亡的TUNEL法.方法:在原已建立的TUNEL技术基础上作了如下改进:①石蜡切片用微波修复技术替代蛋白酶K的消化作用;冰冻切片与细胞爬片或涂片用含0.1%Triton X-100和0.1%枸橼酸三钠混合液作穿透处理.②在滴加反应混合物前,切片用0.1%焦碳酸二乙酯(DEPC)浸泡,抑制内源性核酸内切酶活性.③在POD转换剂前,切片用3%H2O2-甲醇液阻断内源性过氧化物酶活性,并用正常山羊血清封闭非特异结合位点.④苏木素套染细胞棱.结果:改进后的TUNEL法能特异地显示凋亡细胞为棕黄色,其他细胞核为蓝色,且对比明显,背景浅,组织结构完整清晰,便于显微照相等特点.结论:改进后的TUNEL法是一种快速、准确检测以石蜡切片、冰冻切片与细胞爬片或涂片等为实验材料细胞凋亡的有效方法.
目的:尋找一種能快速、準確檢測以石蠟切片、冰凍切片與細胞爬片或塗片等為實驗材料的原位細胞凋亡的TUNEL法.方法:在原已建立的TUNEL技術基礎上作瞭如下改進:①石蠟切片用微波脩複技術替代蛋白酶K的消化作用;冰凍切片與細胞爬片或塗片用含0.1%Triton X-100和0.1%枸櫞痠三鈉混閤液作穿透處理.②在滴加反應混閤物前,切片用0.1%焦碳痠二乙酯(DEPC)浸泡,抑製內源性覈痠內切酶活性.③在POD轉換劑前,切片用3%H2O2-甲醇液阻斷內源性過氧化物酶活性,併用正常山羊血清封閉非特異結閤位點.④囌木素套染細胞稜.結果:改進後的TUNEL法能特異地顯示凋亡細胞為棕黃色,其他細胞覈為藍色,且對比明顯,揹景淺,組織結構完整清晰,便于顯微照相等特點.結論:改進後的TUNEL法是一種快速、準確檢測以石蠟切片、冰凍切片與細胞爬片或塗片等為實驗材料細胞凋亡的有效方法.
목적:심조일충능쾌속、준학검측이석사절편、빙동절편여세포파편혹도편등위실험재료적원위세포조망적TUNEL법.방법:재원이건립적TUNEL기술기출상작료여하개진:①석사절편용미파수복기술체대단백매K적소화작용;빙동절편여세포파편혹도편용함0.1%Triton X-100화0.1%구연산삼납혼합액작천투처리.②재적가반응혼합물전,절편용0.1%초탄산이을지(DEPC)침포,억제내원성핵산내절매활성.③재POD전환제전,절편용3%H2O2-갑순액조단내원성과양화물매활성,병용정상산양혈청봉폐비특이결합위점.④소목소투염세포릉.결과:개진후적TUNEL법능특이지현시조망세포위종황색,기타세포핵위람색,차대비명현,배경천,조직결구완정청석,편우현미조상등특점.결론:개진후적TUNEL법시일충쾌속、준학검측이석사절편、빙동절편여세포파편혹도편등위실험재료세포조망적유효방법.
