上海交通大学学报（农业科学版）
上海交通大學學報（農業科學版）
상해교통대학학보（농업과학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(AGRICULTURAL SCIENCE)
2006年
6期
507-512
,共6页
单松华%汪敏%金维荣%刘俊平%秦红友%陶琦%吴徐华
單鬆華%汪敏%金維榮%劉俊平%秦紅友%陶琦%吳徐華
단송화%왕민%금유영%류준평%진홍우%도기%오서화
禽流感(AIV)%新城疫病毒(NDV)%多重RT-PCR%禽产品%检测
禽流感(AIV)%新城疫病毒(NDV)%多重RT-PCR%禽產品%檢測
금류감(AIV)%신성역병독(NDV)%다중RT-PCR%금산품%검측
根据禽流感病毒NP基因和新城疫病毒F基因各设计1对引物,经优化单项RT-PCR(sRT-PCR)反应体系,建立的多重RT-PCR(mRT-PCR)同时检测禽流感、新城疫的极限分别为10-2.5 EID50/0.1 mL和10-3.75 EID50/0.1 mL,mRT-PCR检测禽流感的敏感性与sRT-PCR一致,mRT-PCR检测新城疫的敏感性较sRT-PCR敏感性下降2个数量级.特异性试验表明,mRT-PCR仅检测到不同亚型(H1、H3、H5、H6和H9)禽流感、不同毒力新城疫病毒,对其他9种禽病原体和SPF鸡尿囊液均未扩增出片断.mRT-PCR检测39株禽流感H1、H5和H9亚型病毒、41株不同宿主源新城疫病毒,结果与sRT-PCR、HI试验完全一致;mRT-PCR和病原分离法同时检测人工感染鸡的组织脏器,2种方法检测禽流感的符合率为93.8%(30/32),检测新城疫的符合率为95.2%(20/21);采用mRT-PCR和病原分离法同时对35份进口禽产品、32份鸡粪拭子检测,2种方法检测禽流感的符合率为100%(67/67),对新城疫的符合率为97.1%(65/67).病原分离法的检出率虽高于mRT-PCR,经统计学分析,两者差异不显著.
根據禽流感病毒NP基因和新城疫病毒F基因各設計1對引物,經優化單項RT-PCR(sRT-PCR)反應體繫,建立的多重RT-PCR(mRT-PCR)同時檢測禽流感、新城疫的極限分彆為10-2.5 EID50/0.1 mL和10-3.75 EID50/0.1 mL,mRT-PCR檢測禽流感的敏感性與sRT-PCR一緻,mRT-PCR檢測新城疫的敏感性較sRT-PCR敏感性下降2箇數量級.特異性試驗錶明,mRT-PCR僅檢測到不同亞型(H1、H3、H5、H6和H9)禽流感、不同毒力新城疫病毒,對其他9種禽病原體和SPF鷄尿囊液均未擴增齣片斷.mRT-PCR檢測39株禽流感H1、H5和H9亞型病毒、41株不同宿主源新城疫病毒,結果與sRT-PCR、HI試驗完全一緻;mRT-PCR和病原分離法同時檢測人工感染鷄的組織髒器,2種方法檢測禽流感的符閤率為93.8%(30/32),檢測新城疫的符閤率為95.2%(20/21);採用mRT-PCR和病原分離法同時對35份進口禽產品、32份鷄糞拭子檢測,2種方法檢測禽流感的符閤率為100%(67/67),對新城疫的符閤率為97.1%(65/67).病原分離法的檢齣率雖高于mRT-PCR,經統計學分析,兩者差異不顯著.
근거금류감병독NP기인화신성역병독F기인각설계1대인물,경우화단항RT-PCR(sRT-PCR)반응체계,건립적다중RT-PCR(mRT-PCR)동시검측금류감、신성역적겁한분별위10-2.5 EID50/0.1 mL화10-3.75 EID50/0.1 mL,mRT-PCR검측금류감적민감성여sRT-PCR일치,mRT-PCR검측신성역적민감성교sRT-PCR민감성하강2개수량급.특이성시험표명,mRT-PCR부검측도불동아형(H1、H3、H5、H6화H9)금류감、불동독력신성역병독,대기타9충금병원체화SPF계뇨낭액균미확증출편단.mRT-PCR검측39주금류감H1、H5화H9아형병독、41주불동숙주원신성역병독,결과여sRT-PCR、HI시험완전일치;mRT-PCR화병원분리법동시검측인공감염계적조직장기,2충방법검측금류감적부합솔위93.8%(30/32),검측신성역적부합솔위95.2%(20/21);채용mRT-PCR화병원분리법동시대35빈진구금산품、32빈계분식자검측,2충방법검측금류감적부합솔위100%(67/67),대신성역적부합솔위97.1%(65/67).병원분리법적검출솔수고우mRT-PCR,경통계학분석,량자차이불현저.
