中国卫生检验杂志
中國衛生檢驗雜誌
중국위생검험잡지
CHINESE JOURNAL OF HEALTH LABORATORY TECHNOLOGY
2007年
11期
1948-1950
,共3页
姚栩%张彩云%陈智伟%杨建娜%郑能雄
姚栩%張綵雲%陳智偉%楊建娜%鄭能雄
요허%장채운%진지위%양건나%정능웅
乙型流感病毒%限制性片段长度多态性%聚合酶链反应%鉴别
乙型流感病毒%限製性片段長度多態性%聚閤酶鏈反應%鑒彆
을형류감병독%한제성편단장도다태성%취합매련반응%감별
目的:应用聚合酶链反应(PCR)连接的限制性片段长度多态性(RELP)技术进行乙型流感病毒及其巴拿马株与维多利亚株两大谱系的鉴别.方法:根据GenBank中登录乙型流感病毒血凝素(HA)区域的核苷酸序列,应用软件进行序列比对,根据HA基因的保守区设计、筛选引物,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增流感病毒HA基因,用限制性内切酶HindⅢ酶切扩增产物并进行琼脂糖凝胶电泳,同时对检测方法进行特异性和灵敏性实验.结果:该方法对乙型流感病毒有特异性,与甲1和甲3型流感病毒无交叉反应.维多利亚株和巴拿马株HA基因均能被特异性引物所扩增,扩增产物经HindⅢ酶切后,乙型流感病毒巴拿马株在电泳谱上出现603 bp与242bp的两个可见片段,而维多利亚株因无HindⅢ酶切位点,仍呈872 bp的一个片段.该方法检测敏感度可达0.1 TCID50.结论:该方法是一种灵敏度高、特异性强的乙型流感病毒维多利亚株与巴拿马株鉴别的方法.
目的:應用聚閤酶鏈反應(PCR)連接的限製性片段長度多態性(RELP)技術進行乙型流感病毒及其巴拿馬株與維多利亞株兩大譜繫的鑒彆.方法:根據GenBank中登錄乙型流感病毒血凝素(HA)區域的覈苷痠序列,應用軟件進行序列比對,根據HA基因的保守區設計、篩選引物,採用逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)擴增流感病毒HA基因,用限製性內切酶HindⅢ酶切擴增產物併進行瓊脂糖凝膠電泳,同時對檢測方法進行特異性和靈敏性實驗.結果:該方法對乙型流感病毒有特異性,與甲1和甲3型流感病毒無交扠反應.維多利亞株和巴拿馬株HA基因均能被特異性引物所擴增,擴增產物經HindⅢ酶切後,乙型流感病毒巴拿馬株在電泳譜上齣現603 bp與242bp的兩箇可見片段,而維多利亞株因無HindⅢ酶切位點,仍呈872 bp的一箇片段.該方法檢測敏感度可達0.1 TCID50.結論:該方法是一種靈敏度高、特異性彊的乙型流感病毒維多利亞株與巴拿馬株鑒彆的方法.
목적:응용취합매련반응(PCR)련접적한제성편단장도다태성(RELP)기술진행을형류감병독급기파나마주여유다리아주량대보계적감별.방법:근거GenBank중등록을형류감병독혈응소(HA)구역적핵감산서렬,응용연건진행서렬비대,근거HA기인적보수구설계、사선인물,채용역전록-취합매련반응(RT-PCR)확증류감병독HA기인,용한제성내절매HindⅢ매절확증산물병진행경지당응효전영,동시대검측방법진행특이성화령민성실험.결과:해방법대을형류감병독유특이성,여갑1화갑3형류감병독무교차반응.유다리아주화파나마주HA기인균능피특이성인물소확증,확증산물경HindⅢ매절후,을형류감병독파나마주재전영보상출현603 bp여242bp적량개가견편단,이유다리아주인무HindⅢ매절위점,잉정872 bp적일개편단.해방법검측민감도가체0.1 TCID50.결론:해방법시일충령민도고、특이성강적을형류감병독유다리아주여파나마주감별적방법.
