兰州大学学报（自然科学版）
蘭州大學學報（自然科學版）
란주대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF LANZHOU UNIVERSITY（NATURAL SCIENCES）
2008年
2期
37-40
,共4页
王鸣刚%赵宏%刘左军%吴亦亮%陈亮
王鳴剛%趙宏%劉左軍%吳亦亮%陳亮
왕명강%조굉%류좌군%오역량%진량
植物螯合肽合成酶%原核表达%融合蛋白%抗血清
植物螯閤肽閤成酶%原覈錶達%融閤蛋白%抗血清
식물오합태합성매%원핵표체%융합단백%항혈청
利用RT-PCR扩增拟南芥螯合肽合成酶(AtPCS1)基因全序列,构建原核表达载体pET28a-AtPCS1并测序.将该载体转化大肠杆菌BL21,用0.75mmol/LIPTG诱导融合蛋白AtPCS1-His的表达,纯化该融合蛋白.用纯化的融合蛋白免疫小鼠,ELISA法测定抗血清的效价可达1:2000.抗血清与融合蛋白及拟南芥总蛋白的western-blot结果表明:制备的抗血清具有较高的活性和特异性.
利用RT-PCR擴增擬南芥螯閤肽閤成酶(AtPCS1)基因全序列,構建原覈錶達載體pET28a-AtPCS1併測序.將該載體轉化大腸桿菌BL21,用0.75mmol/LIPTG誘導融閤蛋白AtPCS1-His的錶達,純化該融閤蛋白.用純化的融閤蛋白免疫小鼠,ELISA法測定抗血清的效價可達1:2000.抗血清與融閤蛋白及擬南芥總蛋白的western-blot結果錶明:製備的抗血清具有較高的活性和特異性.
이용RT-PCR확증의남개오합태합성매(AtPCS1)기인전서렬,구건원핵표체재체pET28a-AtPCS1병측서.장해재체전화대장간균BL21,용0.75mmol/LIPTG유도융합단백AtPCS1-His적표체,순화해융합단백.용순화적융합단백면역소서,ELISA법측정항혈청적효개가체1:2000.항혈청여융합단백급의남개총단백적western-blot결과표명:제비적항혈청구유교고적활성화특이성.
