江苏农业科学
江囌農業科學
강소농업과학
JIANGSU AGRICULTURAL SCIENCES
2008年
5期
63-64,156
,共3页
牛分枝杆菌%融合基因%克隆%表达
牛分枝桿菌%融閤基因%剋隆%錶達
우분지간균%융합기인%극륭%표체
利用PCR技术和重叠延伸剪接(SOE)技术扩增牛分枝杆菌ag85b、esat-6基因和ag85b-esat-6融合基因,克隆到真核载体pcDNA3.1(+)上,构建重组质粒pCAE,将该重组质粒体外转染小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0细胞),间接免疫荧光试验检测目的蛋白的表达情况.结果表明成功构建了真核表达质粒pCAE,转染后的SP2/0细胞中出现绿色荧光,说明ag85b-esat-6融合基因在SP2/0细胞中成功进行了瞬时表达,为进一步研制牛结核病DNA疫苗奠定了基础.
利用PCR技術和重疊延伸剪接(SOE)技術擴增牛分枝桿菌ag85b、esat-6基因和ag85b-esat-6融閤基因,剋隆到真覈載體pcDNA3.1(+)上,構建重組質粒pCAE,將該重組質粒體外轉染小鼠骨髓瘤細胞(SP2/0細胞),間接免疫熒光試驗檢測目的蛋白的錶達情況.結果錶明成功構建瞭真覈錶達質粒pCAE,轉染後的SP2/0細胞中齣現綠色熒光,說明ag85b-esat-6融閤基因在SP2/0細胞中成功進行瞭瞬時錶達,為進一步研製牛結覈病DNA疫苗奠定瞭基礎.
이용PCR기술화중첩연신전접(SOE)기술확증우분지간균ag85b、esat-6기인화ag85b-esat-6융합기인,극륭도진핵재체pcDNA3.1(+)상,구건중조질립pCAE,장해중조질립체외전염소서골수류세포(SP2/0세포),간접면역형광시험검측목적단백적표체정황.결과표명성공구건료진핵표체질립pCAE,전염후적SP2/0세포중출현록색형광,설명ag85b-esat-6융합기인재SP2/0세포중성공진행료순시표체,위진일보연제우결핵병DNA역묘전정료기출.
