CAJ | 학술논문

克隆胚胎基因组的不完全重编程是克隆动物成功率低的主要原因.试验中以第5代牛胎儿成纤维细胞作为供体核,以牛卵母细胞作为受体胞质进行体细胞核移植,用75 nmol·L-1曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)分别处理供体细胞6、12和24 h,通过核移植检测克隆胚胎发育率,并应用激光共聚焦显微镜技术和流式细胞术检测处理细胞和克隆囊胚组蛋白H3K18乙酰化水平和细胞周期.结果显示:随着TSA处理时间的延长,供体细胞组蛋白H3K18乙酰化水平不断提高;以75 nmot·L-1TSA处理供体细胞12 h的克隆胚的囊胚发育率显著高于未处理组(23.5%vs 15.7 %,P<0.05);供体细胞经TSA处理的克隆囊胚组蛋白H3K18乙酰化水平与未处理组相比差异不显著(P>0.5);处理组和对照组细胞G0/G1期和S期比例间存在显著差异(P<0.05).结论:TSA对核供体细胞的处理存在时间效应,75 nmol·L-1TSA处理12 h的牛胎儿成纤维细胞更易被卵母细胞重编程,显著提高了克隆胚的体外发育能力,初步证实TSA是通过提高供体细胞组蛋白乙酰化水平来促进供体细胞重编程的.
극륭배태기인조적불완전중편정시극륭동물성공솔저적주요원인.시험중이제5대우태인성섬유세포작위공체핵,이우란모세포작위수체포질진행체세포핵이식,용75 nmol·L-1곡고억균소A(Trichostatin A,TSA)분별처리공체세포6、12화24 h,통과핵이식검측극륭배태발육솔,병응용격광공취초현미경기술화류식세포술검측처리세포화극륭낭배조단백H3K18을선화수평화세포주기.결과현시:수착TSA처리시간적연장,공체세포조단백H3K18을선화수평불단제고;이75 nmot·L-1TSA처리공체세포12 h적극륭배적낭배발육솔현저고우미처리조(23.5%vs 15.7 %,P<0.05);공체세포경TSA처리적극륭낭배조단백H3K18을선화수평여미처리조상비차이불현저(P>0.5);처리조화대조조세포G0/G1기화S기비례간존재현저차이(P<0.05).결론:TSA대핵공체세포적처리존재시간효응,75 nmol·L-1TSA처리12 h적우태인성섬유세포경역피란모세포중편정,현저제고료극륭배적체외발육능력,초보증실TSA시통과제고공체세포조단백을선화수평래촉진공체세포중편정적.