中国农业科技导报
中國農業科技導報
중국농업과기도보
REVIEW OF CHINA AGRICULTURAL SCIENCE AND TECHNOLOGY
2010年
5期
109-115
,共7页
魁红%罗会颖%董守良%姚斌
魁紅%囉會穎%董守良%姚斌
괴홍%라회영%동수량%요빈
Bispora betulina%酸性木聚糖酶%毕赤酵母%酶活与稳定性
Bispora betulina%痠性木聚糖酶%畢赤酵母%酶活與穩定性
Bispora betulina%산성목취당매%필적효모%매활여은정성
利用简并PCR和TAIL-PCR技术从嗜酸性真菌Bispora betulina中克隆得到一个酸性木聚糖酶基因xyn11BB.该基因全长1 207 bp,含有三段内含子、一段外显子和一个终止密码子,编码由297个氨基酸组成的蛋白质,推测蛋白质含有一个CBM1结构域.将不带原基因信号肽编码序列的eDNA基因以正确阅读框架克降到表达载体pPIC9上,并在毕赤酵母(Pwhmpastoris)GS115中诱导表达,其表达活性达121.15 U/mL.重组蛋白经硫酸铵分级沉淀和阴离子交换柱纯化后达到电泳纯.对其酶学性质分析表明,重组木聚糖酶最适温度为50℃,最适pH为4.5,在酸性条件下具有良好的活性和稳定性,可作为饲料用酶的备选.
利用簡併PCR和TAIL-PCR技術從嗜痠性真菌Bispora betulina中剋隆得到一箇痠性木聚糖酶基因xyn11BB.該基因全長1 207 bp,含有三段內含子、一段外顯子和一箇終止密碼子,編碼由297箇氨基痠組成的蛋白質,推測蛋白質含有一箇CBM1結構域.將不帶原基因信號肽編碼序列的eDNA基因以正確閱讀框架剋降到錶達載體pPIC9上,併在畢赤酵母(Pwhmpastoris)GS115中誘導錶達,其錶達活性達121.15 U/mL.重組蛋白經硫痠銨分級沉澱和陰離子交換柱純化後達到電泳純.對其酶學性質分析錶明,重組木聚糖酶最適溫度為50℃,最適pH為4.5,在痠性條件下具有良好的活性和穩定性,可作為飼料用酶的備選.
이용간병PCR화TAIL-PCR기술종기산성진균Bispora betulina중극륭득도일개산성목취당매기인xyn11BB.해기인전장1 207 bp,함유삼단내함자、일단외현자화일개종지밀마자,편마유297개안기산조성적단백질,추측단백질함유일개CBM1결구역.장불대원기인신호태편마서렬적eDNA기인이정학열독광가극강도표체재체pPIC9상,병재필적효모(Pwhmpastoris)GS115중유도표체,기표체활성체121.15 U/mL.중조단백경류산안분급침정화음리자교환주순화후체도전영순.대기매학성질분석표명,중조목취당매최괄온도위50℃,최괄pH위4.5,재산성조건하구유량호적활성화은정성,가작위사료용매적비선.
