实用医学杂志
實用醫學雜誌
실용의학잡지
THE JOURNAL OF PRACTICAL MEDICINE
2011年
7期
1135-1137
,共3页
受体,骨化三醇%真核表达载体%pcDNA3.1(-)%B-myc/his hVDR
受體,骨化三醇%真覈錶達載體%pcDNA3.1(-)%B-myc/his hVDR
수체,골화삼순%진핵표체재체%pcDNA3.1(-)%B-myc/his hVDR
目的:克隆人维生素D受体(VDR)全长,构建VDR野生型及FokⅠ突变型重组真核表达质粒.方法:提取总RNA,RT-PCR方法扩增将产物用EcoRⅠ和Hind Ⅲ进行双酶切后与pcDNA3.1(-) B-myc/his载体连接形成重组载体;对野生型VDR基因行定点诱变,构建突变型FokⅠ VDR质粒.结果:重组质粒被酶切为两条带,一条为1 300 bp(代表人VDR),一条为5 500 bp(空载体);片段大小与理论值相符.测序结果与Genbank序列完全相同.结论:成功克隆了人VDR基因全长并成功构建了人野生型和突变型FokⅠVDR重组真核表达载体pcDNA3.1(-)B-myc/his hVDR,为进一步研究VDR基因变异与相关肿瘤易感性的分子机制奠定了实验基础.
目的:剋隆人維生素D受體(VDR)全長,構建VDR野生型及FokⅠ突變型重組真覈錶達質粒.方法:提取總RNA,RT-PCR方法擴增將產物用EcoRⅠ和Hind Ⅲ進行雙酶切後與pcDNA3.1(-) B-myc/his載體連接形成重組載體;對野生型VDR基因行定點誘變,構建突變型FokⅠ VDR質粒.結果:重組質粒被酶切為兩條帶,一條為1 300 bp(代錶人VDR),一條為5 500 bp(空載體);片段大小與理論值相符.測序結果與Genbank序列完全相同.結論:成功剋隆瞭人VDR基因全長併成功構建瞭人野生型和突變型FokⅠVDR重組真覈錶達載體pcDNA3.1(-)B-myc/his hVDR,為進一步研究VDR基因變異與相關腫瘤易感性的分子機製奠定瞭實驗基礎.
목적:극륭인유생소D수체(VDR)전장,구건VDR야생형급FokⅠ돌변형중조진핵표체질립.방법:제취총RNA,RT-PCR방법확증장산물용EcoRⅠ화Hind Ⅲ진행쌍매절후여pcDNA3.1(-) B-myc/his재체련접형성중조재체;대야생형VDR기인행정점유변,구건돌변형FokⅠ VDR질립.결과:중조질립피매절위량조대,일조위1 300 bp(대표인VDR),일조위5 500 bp(공재체);편단대소여이론치상부.측서결과여Genbank서렬완전상동.결론:성공극륭료인VDR기인전장병성공구건료인야생형화돌변형FokⅠVDR중조진핵표체재체pcDNA3.1(-)B-myc/his hVDR,위진일보연구VDR기인변이여상관종류역감성적분자궤제전정료실험기출.
