化工学报
化工學報
화공학보
JOURNAL OF CHEMICAL INDUSY AND ENGINEERING (CHINA)
2011年
2期
378-385
,共8页
秦丹华%姚忠%王浩琦%肖易凡%杨敬%徐虹%韦萍
秦丹華%姚忠%王浩琦%肖易凡%楊敬%徐虹%韋萍
진단화%요충%왕호기%초역범%양경%서홍%위평
γ-谷氨酰转肽酶%固定化%介孔二氧化钛%酶学性质
γ-穀氨酰轉肽酶%固定化%介孔二氧化鈦%酶學性質
γ-곡안선전태매%고정화%개공이양화태%매학성질
γ-谷氨酰转肽酶(GGT)在临床诊断和生物催化方面具有重要的应用价值.本文以介孔氧化钛晶须为载体进行GGT的固定化,考察了载体结构特性、吸附时间和给酶量对固定化效果的影响,并对固定化酶的催化特性及其稳定性进行了研究.结果显示,以最可几孑L径为30 nm的介孔TiO2为载体,载体载酶量可达5.07mg·g-1.在给酶量为18.99 U·g-1时,经室温吸附2.5 h,固定化酶活性回收率可达73.05%.固定化酶的pH稳定性和热稳定性均显著优于游离酶,在4~C下保温贮藏60 d、转化22个批次后,固定化酶活力仍可保持初始值的71.30%.经测定,游离酶和固定化酶的米氏常数Km分别为0.79 mmol·L-1和1.05 mmol·L-1,酰基化反应活化能分别为13.59 kJ·mol-1和15.42 kJ·mol-1;固定化GGT的失活反应活化能Ed为92.80 kJ·mol-1,相比于游离酶(49.61 kJ·mol-1)有明显的增加.
γ-穀氨酰轉肽酶(GGT)在臨床診斷和生物催化方麵具有重要的應用價值.本文以介孔氧化鈦晶鬚為載體進行GGT的固定化,攷察瞭載體結構特性、吸附時間和給酶量對固定化效果的影響,併對固定化酶的催化特性及其穩定性進行瞭研究.結果顯示,以最可幾孑L徑為30 nm的介孔TiO2為載體,載體載酶量可達5.07mg·g-1.在給酶量為18.99 U·g-1時,經室溫吸附2.5 h,固定化酶活性迴收率可達73.05%.固定化酶的pH穩定性和熱穩定性均顯著優于遊離酶,在4~C下保溫貯藏60 d、轉化22箇批次後,固定化酶活力仍可保持初始值的71.30%.經測定,遊離酶和固定化酶的米氏常數Km分彆為0.79 mmol·L-1和1.05 mmol·L-1,酰基化反應活化能分彆為13.59 kJ·mol-1和15.42 kJ·mol-1;固定化GGT的失活反應活化能Ed為92.80 kJ·mol-1,相比于遊離酶(49.61 kJ·mol-1)有明顯的增加.
γ-곡안선전태매(GGT)재림상진단화생물최화방면구유중요적응용개치.본문이개공양화태정수위재체진행GGT적고정화,고찰료재체결구특성、흡부시간화급매량대고정화효과적영향,병대고정화매적최화특성급기은정성진행료연구.결과현시,이최가궤혈L경위30 nm적개공TiO2위재체,재체재매량가체5.07mg·g-1.재급매량위18.99 U·g-1시,경실온흡부2.5 h,고정화매활성회수솔가체73.05%.고정화매적pH은정성화열은정성균현저우우유리매,재4~C하보온저장60 d、전화22개비차후,고정화매활력잉가보지초시치적71.30%.경측정,유리매화고정화매적미씨상수Km분별위0.79 mmol·L-1화1.05 mmol·L-1,선기화반응활화능분별위13.59 kJ·mol-1화15.42 kJ·mol-1;고정화GGT적실활반응활화능Ed위92.80 kJ·mol-1,상비우유리매(49.61 kJ·mol-1)유명현적증가.
